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肉豆蔻挥发油药理毒理探究(辽宁中医药大学药学院，辽宁大连116600) 摘要：目的：研究肉豆蔻挥发油的急性毒性、中枢镇静及抗急性心肌梗死作用。方法：肉豆蔻挥发油采用灌胃给药途径，观察并计算小鼠LD50值，观察对小鼠阁下剂量戊巴比妥钠的催眠协同作用，对士的宁引起小鼠惊厥的惊厥潜伏期及百分率、死亡潜伏期及存活百分率的影响，以及对冠脉结扎所致大鼠急性心肌梗死的对抗作用。结果：小鼠灌胃给予肉豆蔻挥发油的LD50为7.67g生药/kg。本品1.07g生药/kg具有对小鼠阁下荆量戊巴比妥钠的催眠协同作用，可对抗士的宁引起的小鼠惊厥，延长死亡潜伏期，增加动物存活百分率。本品对结扎冠状动脉所致大鼠急性心肌梗死模型无明显对抗作用。结论：肉豆蔻挥发油具有一定的中枢抑制作用，对急性心肌梗死无对抗作用。 关键词：急性毒性；中枢抑制；急性心肌梗死；挥发油；肉豆蔻 中图分类号：R285.5　文献标识码：A 文章编号：1673-7717(2007)05-0900-05 肉豆蔻为肉豆蔻科植物myristica fragrans Houtt.的干燥种仁。数千年来被中医临床广泛用于治疗腹泻和呕吐等胃肠道疾病。以往研究表明，其种仁中含有挥发油、脂肪油及蛋白质等多种成分。其中挥发油中主要包括肉豆蔻醚(Myristicin)，松油烯－4－醇(Terpinen－4－ol)，γ－松油烯(γ－Terpinen)，4－蒈烯(4－Carene)以及α，β－蒎烯(αandβ－pinene)等。肉豆蔻具有镇痛、止泻、抗病毒、改善性功能、改善记忆、抗凝血以及保肝等作用。在本研究中，笔者主要进行了肉豆蔻挥发油的急性毒性实验、对阈下剂量戊巴比妥钠催眠的协同作用、抗士的宁惊厥和抗心肌缺血等方面的实验研究。 1实验材料 1.1药物来源 肉豆蔻购于沈阳市药材市场，保存于室温下，并防尘避光。 1.2挥发油制备　挥发油的制备由辽宁中医药大学药学院袁子民博士完成。采用水蒸气蒸馏法提取挥发油，100g肉豆蔻可获得60mL挥发油。将挥发油以芒硝脱水后4℃避光保存，实验中以2％吐温-80稀释成不同浓度备用。 1.3动物　本实验所用实验动物均来源于辽宁中医药大学实验动物中心。急性毒性实验、催眠实验和抗惊厥实验中采用体重18～22g昆明种小鼠，雌雄各半。抗心肌缺血实验中采用3月龄体重200～250g Wistar大鼠，雌雄各半。动物饲养于标准实验条件下：12h光/暗循环，室温(20±2)℃，自由饮食饮水。 2方法 2.1小鼠急性毒性实验　采用昆明种小鼠，于实验前禁食一晚，随机分成6组(每组20只，雌雄各半)。给药组分为5组，分别灌胃给予3.60～14.93g生药/kg的挥发油，对照组给予20mL/kg生理盐水。给药后密切观察小鼠中毒症状和行为改变，观察记录至药后14天。采用Bliss法计算半数致死量。 2.2对阚下剂量戊巴比妥钠的催眠协同实验 以翻正反射消失持续时间超过1min作为动物进入睡眠的判断标准，预实验结果表明，30mg/kg戊巴比妥钠腹腔注射可诱导小鼠进入睡眠状态，故本实验中确定25mg/kg为催眠阈下剂量。将小鼠随机分为5组(每组12只，雌雄各半)，给药组分别给予本品1.07、0.54、0.27 g生药/kg(p.o.)。阳性对照组肌肉注射地西泮2mg/kg，对照组给予生理盐水(p.o.)20mL/kg。于给药后30min腹腔注射戊巴比妥钠25mg/kg并单独观察，计算翻正反射消失百分率。 2.3对士的宁诱导小鼠惊厥的对抗作用 小鼠分组及给药情况同2.2。给药30min后，腹腔注射士的宁1.5mg/kg，将动物单独置于笼内观察30min，记录小鼠惊厥的潜伏期和发生率、死亡潜伏期和存活百分率。 2.4对大鼠急性心肌梗死(AMI)的影响 本研究采用OHvetti报道的方法制作AMI模型。雄性大鼠随机分为6组，每组8只，以30mg/kg剂量的戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后开胸，使用6-0聚丙烯缝合线结扎冠状动脉左前降支，造成心肌梗死模型。假手术组只穿线，不结扎。结扎后5min通过十二指肠给予肉豆蔻挥发油1.33、0.67、0.33g生药/kg，阳性对照组十二指肠给予地尔硫卓16mg/kg，模型组及假手术组经十二指肠给予生理盐水20mL/kg。 以ST段抬高幅度做为评价心肌梗死程度的指标，分别记录结扎前及结扎0、5、15、30、45、60、90、120、180min的心电图。结扎后180min处死大鼠，取下心脏，于－20℃冷冻15min，在结扎点以下将心脏切成5等份，NBT染色，采用图像分析软件Image－ProPlus计算梗死区面积。 2.5统计方法　全部实验结果用x±s表示，采用t－检验，P＜0.05具有统计学意义。