胶体金免疫试验及TP-ELISA法检测梅毒结果回顾性研究.docVIP

胶体金免疫试验及TP-ELISA法检测梅毒结果回顾性研究摘 要 目的：比较两种梅毒检测方法的优劣。方法：用胶体金法与TP-ELISA法对患者血清进行梅毒抗体检测，两种方法结果不符的用TPPA法确认。结果：胶体金法灵敏度77%，假阳性率2.12%，漏检率为33%；ELISA法灵敏度为100%,假阳性率为1.70%，漏检率为0。结论：胶体金法简便、快捷，适用于急诊筛检，但假阳性率与漏检率均较高；TP-ELISA法灵敏度高，但检测时间长，也存在一定的假阳性。两种方法互补可降低梅毒患者的漏检率。 关键词 胶体金 ELISA 梅毒 资料与方法 标本来源：2003年1月～2006年6月的送检血标本6451份，主要为术前检查、输血前检查、皮肤性病专科门诊患者。质控血清（2NCU/ML）由卫生部临检中心提供。 试剂来源：胶体金法试剂由艾康生物技术有限公司提供，TP-ELISA试剂由北京万泰生物药业有限公司提供，TPPA试剂由日本富士株式会社提供。 仪器：芬兰MK3酶标仪，37℃恒温箱，多功能震荡仪，洗板机。 检测方法：胶体金法利用免疫层析分析原理来快速检测患者血标本中是否含有梅毒抗体。胶体金试纸条靠近加样端包被有抗原吸附的硝酸纤维素膜，为检测线；另一端包被兔抗梅毒抗体的硝酸纤维素膜为质控线。两条线均出现红色条带为阳性，仅质控区出现一条红色条带为阴性，质控区未出现红色条带为无效。TP-ELISA试剂（双抗原夹心法）检测IgM、IgG特异性抗体，每板带1个质控品、1个空白对照、2个阳性对照3个阴性对照。利用酶标仪检测，根据吸光度，计算机自动按公式AN+BP+C计算样本阴阳值，样本OD值≥0.18为阳性。阳性标本按1∶2、1∶4、1∶8、1∶16倍稀释做稀释试验，为临床诊断与治疗提供依据。如遇两种方法检测结果不符的标本，用灵敏度与特异性均较高的TPPA法做确证试验 ［1］。 结 果 6451例标本中共检出阳性标本235例，胶体金法检出186例，TP-ELISA法检出阳性239例，结果不符标本54例。 讨 论 由于胶体金免疫结合试验具有简单、快速、单份测定等优点，目前已在临床检测中获得广泛应用［２］。但根据我科几年来的应用体会，胶体金方法检出灵敏度较低，为77%（181/235），漏检率为33%（54/235）,假阳性率为2.12%（5/235）。胶体金方法漏检原因考虑有以下几种：试纸条本身的质量问题；原因及方法学差异，如层析过快，抗原与抗体未来得及结合即已越过检测线；试剂本身的灵敏度较ELISA低；加样量不足或过多；温度影响，温度过低，反应速度降低，在30分钟内弱阳性不能完全显色；工作人员未按时间要求报结果。 TP-ELISA法灵敏度高，漏检度为0，存在一定的假阳性率为1.70%（4/235）,但检测时间长，操作复杂。梅毒抗体是由梅毒螺旋体侵入人体后刺激机体产生的针对螺旋体表面抗原的特异性抗体，人血清中含有非特异性干扰物质（内源性物质），影响ELISA的测定结果，并且抗体与异质抗原间的交叉反应也可在ELISA中发生多种非特异性吸附作用，从而导致假阳性出现［3］。 参考文献 1 黄澍杰，苏坚，曾铁兵，等.19S-IgM-TPPA法检测梅毒患者血清中的TP-IgM.Southern China Journal of Dermato-Venereology，2003，10：4 2 王培之，徐克沂，皮国华.胶体金免疫结合试验在检验医学中的应用.中华检验医学杂志，2000，5：308-309 3 鲍自谦.对献血者梅毒检测的安全性探讨.临床血液学杂志(输血与检验版)，2004，1：16-17 1