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莱菔子水溶性生物碱对SHR降压作用机理探究关键词 莱菔子水溶性生物碱 一氧化氮 血管紧张素Ⅱ 肾素 本实验通过观察莱菔子有效成分水溶性生物碱对自发性高血压大鼠(SHR)的降压作用，以及对大鼠血清NO、血浆AngⅡ含量和血浆肾素活性(PRA)的影响，探讨莱菔子的作用机理。 资料与方法 药品制备：莱菔子水溶性生物碱。 实验动物：自发性高血压大鼠(SHR)40只，雄性，12周龄，体重265g±20g，清洁级。适应性喂养1周后进行实验。 试剂：AngⅡ、PRA试剂盒，NO试剂盒。 主要仪器：RBP-1B型高血压大鼠测压仪；UV-2450型紫外分光光度计；5W-CJ-IF高速冷冻离心机；GC-911型γ-放射免疫计数器。 实验方法：①莱菔子水溶性生物碱的制备：制备方法参照文献[1]，生莱菔子经水提、70%醇沉，得稠膏状提取物，用稀氨水溶解，氯仿萃取，碱水层用盐酸调至pH2~3，滤去不溶物，加雷氏铵盐溶液至沉淀完全，沉淀加少量水洗涤，抽干，用丙酮溶解，过滤，滤液通过中性氧化铝柱，流出丙酮液加饱和硫酸银溶液，滤液减压回收丙酮，析出红棕色结晶，经理化和光谱分析主要为芥子碱硫氰酸盐。②分组及给药：将SHR随机分为5组，空白对照组8只，每日灌服饮用水；高、中、低剂量组各8只，每日分别按45mg/kg、30mg/kg、15mg/kg灌服莱菔子水溶性生物碱(分别相当于生药30g/kg、20g/kg、10g/kg)；厄贝沙坦组8只，每日按60mg/kg灌服厄贝沙坦。每只大鼠按10ml/kg给药或水，每周测量1次体重，并且依据体重调整给药剂量。实验期间各组均饲以普通饲料，并自由饮水，给药时间为8周。③血压测定：使用RBP-1B型测压仪测量大鼠尾动脉收缩压，给药期间2周测1次血压，每次测3个值，取平均数。④样本采集和检测：给药8周后，于末次给药后将动物禁食12h，称重，乌拉坦麻醉，腹主动脉取血处死动物，制备血浆及血清，按试剂盒说明采用放免法检测血浆AngⅡ含量和肾素活性，采用硝酸还原酶法检测血清NO含量。 统计方法：实验数据均采用均数±标准差(X±s)来表示，运用SPSS13.0软件进行计算，组间比较采用方差分析。 结 果 莱菔子水溶性生物碱对SHR血压的影响：治疗8周后，莱菔子水溶性生物碱各剂量组及厄贝沙坦组均明显降低了SHR的血压，各治疗组与空白对照组比较均有显著性差异(P?0.01)，结果见表1。 治疗4周后大鼠血压与治疗前差值比较，莱菔子各组与厄贝沙坦组均有显著性差异(高剂量组P?0.05，中、低剂量组P?0.01)，治疗8周后大鼠血压与治疗前差值比较，莱菔子水溶性生物碱高、中剂量组与厄贝沙坦组差异无显著性(P?0.05)，但低剂量组与厄贝沙坦组仍差异有显著性(P?0.01)，结果见表2。 莱菔子水溶性生物碱对SHR血浆AngⅡ、PRA及血清NO含量的影响：莱菔子各剂量组均能明显升高大鼠血清NO含量，以高剂量组最为明显(P?0.01)，厄贝沙坦组大鼠血清NO含量无明显升高(P?0.05)；同时莱菔子各组均能降低大鼠血浆AngⅡ含量，而厄贝沙坦组则明显升高大鼠血浆AngⅡ含量，但各组对PRA无明显影响，结果见表3。 讨 论 SHR是一种遗传高血压模型，与人类的原发性高血压相似。现代研究认为，原发性高血压的发病机理十分复杂，是由多因素、多层次共同作用的结果。已知肾素－血管紧张素系统(RAS)是调节机体血压的重要环节，其中起推动作用的是肾素的释放，静脉血中的肾素将肝脏产生的血管紧张素原水解为血管紧张素ⅠAngⅠ)，再经肺循环中的血管紧张素转换酶(ACE)的作用转化为血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)。AngⅡ可通过其效应受体使小动脉平滑肌收缩，外周血管阻力增加,从而使血压升高[2]。而NO是内皮细胞(EC)释放的内皮衍化舒张因子(EDRFs)，在高血压的发生和发展中起着重要作用。作为一种新型生物信息递质，NO具有舒张血管、降低血压、抑制血管平滑肌细胞(VSMC)的增殖和血小板粘附等许多重要的生理作用，在减少冠心病、高血压的发病中具有重要意义。本实验测定了大鼠血浆AngⅡ含量和PRA，以及血清NO含量，结果发现不同剂量的莱菔子水溶性生物碱均能提高大鼠血清NO含量，降低血浆AngⅡ含量，但对PRA无影响。而使用血管紧张素1型受体(AT1R)阻滞剂厄贝沙坦治疗组，大鼠血浆AngⅡ水平则明显升高，说明大量的AngⅡ被阻滞未能与AT1R结合，致血管平滑肌松弛，血压下降。本实验结果说明莱菔子水溶性生物碱的降压作用可能与降低血浆AngⅡ水平、提高血清NO含量有关，而与肾素活性和AT1R无关。(鸣谢指导教师 盖国忠) 参考文献 1 王维兰,朱进,李钟大，等.莱菔子降压活性成分的研究