免疫去势疫苗的制备及相关试验.pdfVIP

甘肃齑牧兽医 2008年2(总199)期 0 1等1簪 ● 毒 l__研 l i 究：； 免疫去势疫苗的制备及相关试验 《 。报 j世 ． 冉 张 剑 ，魏锁成 ，严亚搏： 0● * } { (1．西北民族大学生命科学与工程学院，甘肃兰州 730030； 2．甘肃农业大学动物科技学院) 摘要：以促性腺激素释放激素类似物(GnRH—d)为原料刺备免疫去势疫苗，并参照相关标准分 别对抗原乳剂进行了无菌检验、安全，}生检验、物理性状检查以及免疫效力测定，均取得了良好的效 果，为进一步的研究提供了依据。 关键词：免疫去势；GnRH—d；酶联免疫；特异性IgG 中国图书分类号：S 857．12 9 文献标识码：A 文章编号：lOo6I一799x(2008)O2删 2—o4 免疫去势技术是20世纪60年代末在免 分子抗原，并与弗氏不完全佐荆乳化制成 疫学、生物学、内分泌学及生理学取得成就的 GnRH—d免疫去势疫苗，并对该疫苗进行了 基础上逐渐兴起的，它以激素抗体主动或被 安全性及免疫试验。 动地中和动物机体的内源性激素，使其生物 1 材料 活性部分或完全丧失，引起内分泌系统的平 1．1 主要试剂 衡失调，从而改变下丘嘀一垂体一性腺轴之 促性腺激素释放激素类似物GnRH—d 间的正常反跌渊节关系，减少性腺激素的合 (Alarelin)，Zillion公司生产，纯度(HPLC) 成与释放，使动物完全或大部分地丧失生育 I98．99％ 。 能力而达到去势目的 。促性腺激素释放 碳二亚胺盐酸盐(EDC。HCL)，上海延长 激素(GnRH)的发现迄今已有30多a，在此 生化科技发展有限公司生产，纯度(HPLC) 期间合成了大量的GnRH类似物，并应用于 I99．23％ 。 临床。GnRH类似物(激动剂)是在天然的 牛血清白蛋白(BSA)，美国SIGMA公司 GnRH分子结构上替换了第6和10位上的 生产。弗氏不完全佐剂，美国SIGMA公司 氨基酸所得，这种结构可减慢肽的降解，延长 生产。 半衰期，使受体结合力增强至正常的100～ 培养基：硫乙醇酸培养基(T．G)、酪胨琼 200倍。笔者在前人研究的基础上，结合相 脂培养基(G．A)以及葡萄糖蛋白胨汤培养 关资料 。J，将促性腺激素释放激素类似物 基(C。P)，北京陆桥技术公司生产。 (GnRH—d)通过EDC与BSA偶联结合制成大 包被液(pH 9．6)：NattCO 2．93 g，Na． CO3 1．95 g，加蒸馏水至1 000 mL，置4℃保存 收稿日期：20H。7—f)8—13 备用 作者简介：张 剑(1981～)，男，在读硕士，主 洗涤液(0。01 moL／L，pH 7．4 PBST)： 要从事临床兽医学研究 NaC1 8．0 g，KH2PO4 0。2 g，Na2ttPO4·12H20 研究报告 3 2．9 g，KC1 0．2 g，Tween一20 0．5mL，