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手性药物消旋体拆分的研究进展 胡健，张乐之，罗．平，李福涛，周红 (1．第三军医大学药理教研室，重庆400038) 关键词手性药物；对映体；消旋体；拆分 中图分类号TQ460文献标识码A文章编号1004—0188(2005)01—0105—03 目前获取手性药物单一对映体的方法，主要以金属催化 的不对称合成为主；利用天然的手性源(如糖类、萜类、氨基 酸、羟基酸、生物碱等)以及有机合成中产生非天然手性源(如 醇、胺、环氧化合物等)直接合成也是一个方面。但目前大多 数不对称合成还存在成本太高，或收率太低，或光学纯度不够 等诸多的问题。因此，对外消旋体进行拆分仍然不失为另一 条重要途径。特别是在新药开发的初期阶段，为判断如何进 一步开发，需要将消旋体和左、右二个单一对映体分别进行药 效学、药动学和毒理学比较时，拆分法就显得尤为必要。事实 上，目前大约65．oH的非天然手性纯药物是通过外消旋药物 或中间体拆分制造的。。本文就目前消旋体拆分中常用手性 试剂、手性引入方法及拆分方法等作一综述。 I常用手性拆分剂 手性拆分的关键在于选择合适的手性拆分剂。目前常用 的手性拆分剂主要有：环糊精、蛋白质、聚糖类、金属离子配合 物、冠醚、酒石酸衍生物、大环抗生素以及表面活性剂等。 (1)环糊精(CD)是最常用的一类手性拆分剂，包括a一、B一、7一三 种自然形式和为数众多的衍生物。其中以B—CD类分子大小 适中，应用最为广泛。CD使用方式很多，既可用作流动相添 加剂，也可用作手性固定相。可采用气相色谱(GC)、高效液相 色谱(HPLC)、毛细管电泳(CE)、毛细管胶束电色谱(MECC) 等多种操作模式。 (2)蛋白质作为手性选择剂最适合于拆分具有生物活性物质的对映体，如氨基酸等。用于手性分离的蛋白质主要有：人血清白蛋白、牛血清白蛋白、抗生物素蛋白、卵类粘蛋白、a一酸性糖蛋白等。蛋白质通常作为添加剂加入缓冲液中，也可键合到凝胶、硅胶颗粒或环糊精聚合物上制成手性柱。 (3)聚糖类包括低聚糖类和多聚糖类。低聚糖类主要有麦芽糖糊精；多聚糖类包括纤维素和直链淀粉衍生物，一般用作手性固定相。 (4)将金属中心离子与手性配合剂形成络合物，可用作手性流动相添加剂，也可用作配体交换色谱手性固定相(LEC)。 (5)冠醚可用于HPLC、GC和CE，以18一冠醚一6一四羧酸使用最多。主要用于分离胺和氨基酸及衍生物。但冠醚毒性较大，柱效较低。(6)酒石酸衍生物∞主要有酒石酸酯类、酒石酸单酰胺类、酒石酸二酰胺类等，可用作手性流动相添加剂和手性固定相。 (7)大环抗生素是相对新型的手性选择剂。主要有万古霉素、利托菌素A和替考拉宁等以及A82846B、利福霉素SV、利福霉素B、糖肽抗体等，可用作手性流动相添加剂或手性固定相。目前使用大分子抗生素已有350多个酸性和阴离子外消旋体被拆分。表面活性剂主要 用于毛细管胶束电色谱。 2手性引入的方法 目前，手性引入的方法主要有三种：即柱前手性衍生化法、手性固定相法和手性流动相添加剂法。 2．I柱前手性衍生化法(C【)A法)是间接分离对映体的方 法。先使外消旋药物与手性衍生化试剂(CI)A)作用，转变成 非对映异构体后再进行分离。常用手性衍生化试剂主要 有∞：酰化试剂、手性胺类试剂、异(硫)氰酸酯类、氯甲酸酯 类、邻苯二醛(OPA)和手性硫醇、h y试剂等。缺点：间接 拆分法复杂而且易产生消旋现象；要作复杂的论证；反应可能 不完全，过剩的试剂分离困难；大量的额外样品处理等。 2．2手性固定相(CSP)法与非手性固定相相比较，手性固 定相方式分离时豆，而选择性和分离度相对较高。常用的 手性固定相有：氨基酸和酰胺型手性固定相、Pirkle型手性固 定相、配体交换色谱(LEC)手性固定相、聚多糖类手性固定 相“)、环糊精及其衍生物手性固定相、蛋白质手性固定相、手 性分子烙印固定相‘8]、合成聚合物手性固定相等。 2．3手性流动相添加剂(C)法常用的手性流动相添 加剂主要有：(1)手性包合物如环糊精、手性冠醚等。(2)手性 离子对试剂。(3)金属配体络合物。(4)手性氢键试剂。(5) 手性诱导吸附剂等。缺点：CMPA法消耗手性试剂量大，而拆 分效果往往不及手性固定相法。 3拆分方法 3．1色谱法(1)气相色谱(GO：气相色谱拆分对映体可通·106·西南国防医药2005年第15卷第1过衍生化成非对映体或使用手性固定相，通常还是手性固定相效果更好。气相色谱只能用于具挥发性药物或衍生后具挥发性药物的分离，拆分范围有限。 (2)高效液相色谱(HPLC)：目前对手性药物的分离分析大多采用手性固定相高效液相色谱法直接分离。该方法具有操作简便、不需衍生化、不改变组分结构、便于收集等显著优点。缺点是该法需要消耗大量的 有机溶剂，操作费用高而且污染严重。此外还存在溶