17个STR基因座快速多重扩增体系的建立及应用.pdfVIP

4r jHt, 11 t .f志 CHIN J FORENSIC MED 2015 年第 30 卷第 1 期 ·步仓 牵岳· 17 个 STR 基因座快速多重扩增体系的建立及应用 韩俊萍l 气魏丽3 ，叶健2 ，欧元2 ，王英元3 ，胡兰2 ，李彩霞2 ，刘耀2 (1.中国人民公安大学，北京 1 仪附38; 2. 公安部物证鉴定中心，北京 1∞038; 3. 山西医科大学，太原 036αlO) [摘要]目的建立 17 个STR 基因座多重PCR 快速扩增体系。方法采用人血样本提取DNA 并定量，用于多重 快速扩增体系分型准确性检测:采用标准品9948 ，设定稀释度，检测体系灵敏度;采用定量男女DNA 样本按11 种比例 混合，检测体系对混合样本的分型能力;在标准品中加入干扰物质血红素和腐植酸，检测体系的抗干扰能力;对5 种非 人样本进行检测，评价体系的特异性;对实际案例进行检验，评价体系实际应用价值。结果 采用本文体系，在65min 内，用 0.5 -2ngDNA 模板量能获得较好的扩增效果，分型结果准确稳定，扩增均衡;种属特异性好;血红素运50μnol/L ， 腐植酸:::;;25nglμL 时可不受干扰准确分型;男女混合样本中单一样本量不低于 1110 即可进准确进行判断;对实际案 例常见生物检材的检验结果良好。结论本文 17 个 STR 基因座快速多重扩增体系可显著缩短扩增时间，技术性能 符合实际检案要求，可在实践中选用。 [关键词}法医物证学;快速 PCR;DNA 分型 [中图分类号]D凹95.2 [文献标识码]A [文章编号]1∞1-5728 (2015) 01-∞39-ω doi:IO.13618/j. issn. 1∞1-5728.2015.01.011 The construction of a rapid m叫tiplex PCR 创nplification system of 17 STR loci and its application in foremic science (Han Junping1 ,2 , Wei Li3 , Ye JiaE12 , Ou Yuan2 , Wang Yingyuan3 , Hu IAd , U Caixiaz , 2 Liu Yao /1. Chinese People s Public Security Univers时， Beijing 1∞038 ， China; 2. lnstitute 0/ Forensic Science Ministry 0/ Public Security , Beijing 1∞038 ， China; 3. Shα阳i Medical University , Taiyuan 036∞0 ， China) ( Abstract 1 Objective To develop a rapid multiplex PCR amplification system of 17 STR loci. Methods Accuracy detection of the rapid multiplex PCR amplification system was carried out in a sample of human blood after extracted and quantified , sensitivity was studied using 9948 DNA standard with a serial dilution. Mixture studies were conducted using quantified male/female DNA with 11 mixture ratios. Inhibitor tolerance was carried out by adding hemat