H3亚型猪流感病毒抗原捕捉ELISA检测方法的建立.pdfVIP

第35 卷第7 期 中国预防兽医学报 Vol.35, No.7 2013 年 7 月 Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine Jul. 2013 doi: 10.3969/j .issn.1008-0589.2013 .07.13 H3 亚型猪流感病毒抗原捕捉 ELISA 检测方法的建立 陈艳，乔传玲\杨焕良，孔维，辛晓光，陈化兰 (中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室.黑龙江哈尔滨 15∞01) 摘 要:为快速检测 H3 亚型猪流感病毒(SN) ，本研究将一株H3N2 亚型 SN 特异性单克隆抗体(MAb)进行 纯化，建立了以多抗作为包被抗体， MAb 作为检测抗体的 H3 亚型 SN 抗原捕捉ELlSA (AC-ELlSA)方法。并对 该方法的特异性和敏感性进行了分析，其敏感性是血凝试验的 4 倍，与猪繁殖与综合征病毒、猪圈环病毒、猪瘟 病毒、猪细小病毒以及Hl、 H5， H9 亚型 SIV 均没有明显的交叉性反应，批间和批内重复试验变异系数均小于 10 %。应用建立的 AC-ELlSA 方法对 84 份 H3 亚型 SIV 实验室感染样品进行检测与鸡胚滴定病毒结果符合率达 90 .47 %。本实验建立的 AC-ELISA 方法具有良好的特异性和敏感性，可用于 H3 亚型 SIV 的临床检测。 关键词:猪流感病毒; H3 亚型;单克隆抗体;抗原捕捉ELISA 中图分类号: S852.65 立献标识码:A 文章编号: 1008-0589(2013)07句。566-04 Development of antigen capture ELrSA for detecting H3 subtype swine influenza virus CHEN Yan , QIAO Chuan-ling., YANG Huan-lia吨， KONG Wei , XIN Xiao-guang , CHEN Hua-lan (Anìmal Influenza Laboratory of the Minis町of Agricultural , State Key Laboratory of Veterin町Biotechnology , Harbin Veterinary Research Institute , Chinese Academy of Agricultural Sciences, Harbin 150001 , China) Abstract: To developed the rapid detection method for H3 subtype swine influenza virus (SN) , an antigen-capture enzyme-linked immunosorbent assay (AC-ELISA) was deveIoped with the monoclonal antibody (岛iAb) 4E8 against HA prote.函。f H3 SIV as detector antibody, and the polyclonal antibody as cap阳re antibody. The results showed 也at the AC-ELISA was 4 times :sensitÎve higher than that of hemagglutination assay. In addition, Ît had no crQss-reaction with porc.扫e reproductive syndrome virus, porcine circovirus virus , classical swine f