正交实验法探究山楂提取物对α-淀粉酶活性影响.docVIP

正交实验法探究山楂提取物对α-淀粉酶活性影响[摘要] 目的：通过了解山楂提取物对α-淀粉酶活性的影响获得山楂提取物与α-淀粉酶的复合制剂配方原则。方法：通过正交实验法研究不同山楂60%乙醇回流提取物浓度、反应温度、pH对α-淀粉酶活性的影响。结果：pH 6.8、温度40℃、加入20%的山楂提取物的α-淀粉酶反应活性最高。结论：该试验结果为山楂α-淀粉酶复方制剂的配制提供了有价值的配方和配方条件。 [关键词] 山楂提取物；α-淀粉酶；正交实验法；复合制剂 [中图分类号] R286 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2011）11（b）-035-02 Study on the activity of α-amylase in extracts of Hawthorn fruit by orthogonal method CHEN Muzhou1, ZOU Ping2, PENG Guoping2, YANG Hua2 1.Guangdong Zhongsheng Pharmaceutical Co., LTD, Guangdong Province, Dongguan 523325, China; 2.College of Bioscience and Biotechnology, Hu′nan Agricultural University, Hu’nan Province, Changsha 410128, China [Abstract] Objective: To obtain a formula principle of compound preparation with extracts of Hawthorn fruit and α-amylase by understanding the effect of extracts of Hawthorn fruit on α-amylase. Methods: The effect of extracts concentration of Hawthorn fruit by reflux extraction with 60% ethanol, reaction temperature and pH value on α-amylase activity were studied by orthogonal tests. Results: The activity of α-amylase were the strongest in temperature of 40℃ and 6.8 of pH value with 20% extract of Hawthorn fruit. Conclusion: The test results afford the valuable formula method and formula conditions of compound preparation with Hawthorn fruit and α-amylase. [Key words] Extracts of Hawthorn fruit; α-amylase; Rrthogonal test; Compound preparation 山楂是一种能够消食导滞的中药材，对消肉食积滞作用更好，除含有大量有机酸外，还有60余种黄酮类化合物：芹菜素、山奈酚类、木犀草素、槲皮素类及二氢黄酮类等[1-3]，α-淀粉酶能促进多糖物质的消化吸收，二者配合能够获得效果更好的消食效果[4]。本文旨在研究山楂提取物对消食药物α-淀粉酶的活性影响，以期获得一个合适的山楂提取物添加量和山楂提取物与α-淀粉酶复合消食制剂配制条件。 1 仪器与材料 山楂（市售），α-淀粉酶（湖南尤特尔生化有限公司提供），60%乙醇溶液（V/V），蒸馏水，3，5-二硝基水杨酸试剂（取3，5-二硝基水杨酸1.0 g，溶于20 ml的1 mol/L氢氧化钠中，加入50 ml蒸馏水，再加入30 g酒石酸钾钠），麦芽糖，淀粉，pH梯度缓冲溶液（用0.2 mol/L Na2HPO4与0.1 mol/L柠檬酸按比例配制）。 2 方法与结果 2.1 山楂提取物的提取 2.1.1 麦芽糖标准曲线的制作 应用DNS法[5-6]以光密度值OD为纵坐标（Y），麦芽糖含量为横坐（X）标绘制标准曲线。结果显示，麦芽糖标准曲线为Y=7.664 1X-0.057 3，r=0.993 5，线性关系良好。 2.1.2 山楂提取物的提取 准确称取2 g山楂粗粉，用12倍量60%的乙醇在90℃下各回流提取2次，每次1 h，合并提取液，过滤，