试剂标准操作规程(SOP)-h-CRP.docVIP

试剂标准操作规程 项 目 超敏C-反应蛋白 hCRP 方 法 免疫比浊法 编写人 日期 审核人 日期 批准人 日期 文件分发部门和/或个人 本规程自2004年8月01日起实施，每1年复审一次 医务科保管者 院长办公室保管者 院档案室保管者 检验科主任 临床化学检验室 目 录 检测原理 标本采集与处理 2.1 受检者的准备 2.2 静脉采血 2.3 抗凝剂 2.4 标本处理 3．试剂 3.1 试剂 3.2 校准血清 3.3 试剂与校准血清的稳定性 4．仪器 5．操作 6．计算 7．操作性能 7.1 精密度 7.2 准确度 7.3 灵敏度 7.4 可报告范围 7.5 特异性 7.6 干扰 8．参考值 9．临床意义 附录A: 参数 1. 检测原理 570-600nm 样本中HCRP + 试剂中的HCRP抗体 -----------------大分子免疫复合物 在570-600nm监测生成的复合物的浊度变化，与样本中HCRP含量成正比。 标本采集与处理 2.1 受检者的准备： 病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。 2.2 静脉采血： 除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。 2.3 抗凝剂： 不使用抗凝剂。 2.4 标本处理： 血清在2 - 8(C 下储存不超过一周或在-20(C可保存2个月。 3．试剂 3.1 试剂： 本科使用北京利德曼生化技术有限公司hCRP试剂盒，为液体双试剂，各组分如下： 组 成 初始浓度 R1: 缓冲液 氨基乙酸 170mM NaCL 100mM EDTA-Na/二水磷酸二氢钠 50mM 牛血清白蛋白 1% R2: 胶乳试剂 CRP抗体包被的胶乳颗粒 3.2：校准血清 使用北京利德曼生化技术有限公司提供的多项免疫类标准液。其中包含HCRP。 校准频次： 全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。 3.3 试剂与校准血清的稳定性： 原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。 试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂R1颜色为无色，试剂R2颜色为乳白色，当试剂变色或出现沉淀，按照试剂失效处理。 多项免疫类标准液储存在2-8℃至标签所示失效日期。第一次开启后，不要冷冻。在2-8℃下将瓶盖拧紧保存，标准品可以储存长达6个星期的时间。 4．仪器 YY型号仪器。 5．操作 样品为血清。本法为免疫比浊法。参数见后附，附录A。 试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。 6．计算 测定标准液系列的吸光度，建立吸光度-浓度对应关系的工作曲线。测定标本的吸光度，并在工作曲线上读取浓度值（mg/dL）。如标本的吸光度值超过线性范围，则需稀释标本后，重新测量。 7．操作性能 7.1 精密度： 批内CV 1.58%，批间CV 3.42%。 7.2 准确度： 测量结果在利德曼质控血清靶值±2SD范围内。不同方法学试剂的质控结果之间会存在差异，使用时请确保质控选择与试剂的方法学保持一致。 7.3 灵敏度： hCRP浓度为：5.80mg/dL时，吸光度A600nm约为1.12-1.25。 7.4 可报告范围： 血清与试剂用量之比为1:50时，测定范围为0.06～16mg/dL。 7.5 特异性： 测量值在给定值的90%-110％范围内。 7.6 干扰： 内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。 8．参考值 成人：0～0.5mg/dL；新生儿，脐血：0.06 mg/dL；4天～一个月婴儿：0.16 mg/dL。 9．临床意义 C-反应蛋白（CRP）是在炎症过程中出现在血液中的一种非特异性急相反应蛋白。患有急性炎症的病人CRP浓度的变化比红细胞沉积的速度快。CRP浓度的升高以一种非特异性的方式发生在各种组织病变，如：感染期、风湿性关节炎、心肌梗塞、恶性肿瘤等。 研究表明CRP不仅是炎症的非常好的指示物，当显著增加时，它也是冠状动脉疾病的很好的指示物。CRP的浓度在正常参考范围内时，在明显健康的个体中，可以评估