扩张床吸附分离丙酸耦合维生素B12发酵-OALib.PDF

第 10卷第4 期 过 程 工 程 学 报 Vol.10 No.4 2010 年 8 月 The Chinese Journal of Process Engineering Aug. 2010 扩张床吸附分离丙酸耦合维生素 B 发酵 12 1,2 1 1 2 1 李凌云 ， 王 鹏 ， 王云山 ， 马润宇 ， 苏志国 (1. 中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室，北京 100190；2. 北京化工大学生命科学与技术学院，北京 100029) 摘 要：采用扩张床吸附丙酸与维生素 B12 发酵相耦合以解除丙酸对维生素 B12 发酵的抑制. 选用弱碱性阴离子交换 树脂330 对发酵液中的丙酸进行了扩张床吸附和解吸工艺研究，丙酸浓度 10 g/L (pH 5.0)、树脂量为发酵液体积的 1/10、 上料流速 710 mL/min 时，湿树脂动态吸附量为 57.73 mg/g；解吸剂NaOH 3 mol/L 、流速 1.32 mL/min 时，解吸率为 93.2%. 将此工艺用于发酵过程中丙酸的原位吸附分离，构建了一种新型原位分离发酵系统. 通过降低发酵液中丙酸的 浓度，有效缓解了丙酸对细胞生长的抑制作用，提高了细胞发酵密度，维生素 B12 及丙酸产量相对于补料分批发酵分 别提高了 26.6%和 39.4%. 关键词：维生素B12；丙酸；扩张床；吸附；耦合 中图分类号：TQ028; TQ466 文献标识码：A 文章编号：1009−606X(2010)04−0762−05 1 前 言 液中捕获目标产物，从而减少了操作步骤，能降低成本， 微生物细胞发酵生产各种产品时遇到的一个难题 缩短操作时间. 是细胞代谢产物的反馈抑制，其现象是：在微生物细胞 本研究在前期工作[14,15] 的基础上，将扩张床吸附技 发酵过程中，菌体以特定的底物为营养生长繁殖的同 术应用于维生素 B12 发酵过程中丙酸的在线分离，构建 时，向细胞内外分泌代谢产物，某些细胞代谢产物浓度 新型分离发酵系统，集丙酸分离与维生素 B12 连续发酵 达到一定范围后，目标产品不再增加，导致发酵产率无 生产于一个操作单元中. 将该系统应用于维生素 B12/丙 法提高. 如果采用过程工程手段将反馈抑制物及时从发 酸联产，以期通过在线解除丙酸对菌体的抑制作用，实 酵体系中除去，就有可能解除反馈抑制，增加发酵产率， 现菌体细胞的高密度培养，提高维生素 B12 的产量，同 [1,2] 时分离得到副产物丙酸. 创造巨大的经济效益 . 费氏丙酸杆菌发酵生产维生素B12 过程中产生以丙 2 材料与方法 酸为主的有机酸，丙酸积累会严重抑制细胞生长[3]. 发 酵过程中将发酵液中的丙酸选择性分离，可解除丙酸对 2.1 材料与试剂 菌体生长的抑制作用，实现菌体细胞高密度培养[4,5] ，分 费氏丙酸杆菌(Propionibacterium freudenreichii) 离所得丙酸也是重要的化工产品，广泛用于食品、饲料、 CICC 10019，购自中国工业微生物菌种保藏中心. 防腐添加剂等领域[6,7].