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葛根总黄酮及葛根素提取及其分离纯化探究进展
葛根总黄酮及葛根素提取及其分离纯化探究进展摘要:本文主要对葛根总黄酮和葛根素的提取及其分离纯化方法从传统水提法到现代的新技术进行了综述,并对其研究现状进行了分析,旨在为葛根有效成分的提取及纯化方法提供借鉴。
关键词:葛根 总黄酮 葛根素
葛根(Radix puerariae)为豆科植物野葛Puerafia lobata(Wiolld)Ohwi的干燥根,其味甘、辛、性平,既是中药材又是营养丰富的食用原料。市场对葛根黄酮的需求越来越大。但由于科技投入的不足,国内的葛根黄酮制取技术相对落后,生产效率低、能耗大、环境污染严重、杂质含量高,产品缺乏市场竞争力。此前以葛根为原料大量生产葛根总黄酮的方法亦未见报道。近年来,天然植物有效成份因其功效明显、天然低毒等特点倍受青睐,引发了全世界范围使用天然草本植物来预防和治疗各种疾病的热潮。我国拥有如银杏叶、茶叶、葛根、大豆、山植等天然植物资源,黄酮类化合物是这些植物中主要活性成分之,研究表明,它们大多具有多种生物活性和药理功能,这些作用使其在医药、食品、化妆品等工业中应用广泛。目前,黄酮类化合物的提取及分离纯化研究成为这一领域的研究热点。葛根是我国一种传统中药,对于葛根的药用价值早在《神农本草经》中就有记载,葛根具有解痉退热、生津、透疹、升阳止泻等功能。同其它大多数黄酮类化合物相似,葛根黄酮类化合物也具有多种药理功能,如改善血液循环、降血压、降血糖、降血脂、抑制动脉硬化,抗心率失常,抗血小板聚集、抗肿瘤、抗缺氧与抗氧化等。此外,葛根目前已被卫生部认定为药食两用的山地植物。葛根素是从葛根中所提取得到的一种异黄酮类化合物,是葛根总黄酮中的一种。实验证明其有扩张心脑血管,降低心肌氧耗,改善心肌收缩功能和促进血液微循环作用,可用于治疗冠心病、视网膜动、静脉阻塞和突发性耳聋等微循环障碍病。现在葛根总黄酮因其显著的药用价值已被广泛应用于医药工业、食品工业、日用化工等领域。近年来,随着对天然植物药材研究的深入开展,葛根的研究范围有了进一步拓展,其中葛根的总黄酮和葛根素提取及纯化的研究得到了广泛关注,现将葛根总黄酮和葛根素的提取及其分离纯化研究概况综述如下。
1 葛根总黄酮的提取
1.1 醇回流法
醇回流法主要以水、乙醇、碱性醇、石灰水、甲醇、丙酮等溶媒,加热回流。回流提取次数为2~3次,提取葛根总黄酮。邵立波等对葛根中黄酮类化合物提取的影响因素进行了系统研究。确定固液比为1:10,浸提液体积为100mL用乙醇提取一次,就可浸提出葛根中近95%的黄酮类化合物。在此条件下浸提获得粗提物的总黄酮含量为2.60%。刘火安等采用单因素和正交试验对提取葛根总黄酮的工艺条件进行优化,表明最佳工艺条件是以9倍量的30%乙醇提取3次,每次1h。其工艺更加科学合理、简单,成本低,适合于生产应用。周文斌通过正交试验,研究了影响葛根中黄酮类物质提取的4因素(乙醇浓度、温度、pH、浸提时间)。实验称取葛根干燥粗粉25g共9份,按时间、温度、溶剂(乙醇浓度)、pH设计正交试验因素水平表,每一试验号浸提2次,每次浸提用时为设计时间的半,每次溶剂用量为100mL,过滤,合并滤液浓缩至lmL相当于0.5g葛根,用35mL正丁醇分3次萃取,合并萃取液,减压蒸去正丁醇,用95%乙醇溶液将残渣移至25mL的容量瓶中定容,吸取1.0mL,用上述乙醇溶剂于10mL容量瓶定容,在250nm测吸收值,计算出提取的黄酮量。结果表明:用pH为8,浓度在90%以上的乙醇溶液,在80℃下浸提2h,即可提得93%的葛根总黄酮物质。该法使用试剂安全,为提取黄酮后的葛根后续利用提供了条件。
1.2 醇渗漉法
赵浩如等用渗漉法等四种方法提取葛根总黄酮。将葛根药材粉末6份,每份4.5g,分别用渗漉法(乙醇为溶剂,浸泡12h,装入1×9cm渗漉管渗漉,流速分3种方法进行考察。)、浸渍法、回流法、煎煮法提取葛根总黄酮。与其他方法比较,则回流法得率最高,渗漉法次之,煎煮法得率最低。结果表明用回流法得率最高,其次为渗漉法’用煎煮法提取得率最低,在渗漉法中以乙醇为溶剂,速度为2ml/gmin的渗漉法提取的总黄酮得率最高。对于渗漉选用何种浓度的乙醇以及怎样用初漉液做连续渗漉尚待进一步研究。
1.3 浸渍法
潘见等通过六组单因素试验(溶剂浓度、固液比、浸取时间、温度、次数、pH值)和四因素(溶剂浓度、固液比、温度、pH值)正交试验,对葛根黄酮的浸取工艺进行了优化研究,表明在温度85℃、pH值为8的条件下,用10倍于葛根量的浓度为70%的乙醇,浸取2次,每次3h,葛根黄酮浸取效果最好,浸取率在9%以上、浸出物黄酮含量大于40%。较适合于工业生产。
1.4 微波辅助萃取法
李芙蓉等首次运用微波技术从葛根中提取出总黄酮测得葛根中
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