蒙药那如3味丸中没食子酸含量测定.docVIP

蒙药那如3味丸中没食子酸含量测定摘 要：目的：建立蒙药那如3味丸中没食子酸的含量测定方法 。方法：采用高效液相色谱法测定没食子酸的含量。色谱柱为Diamonsil-C18(250mm×4.6mm，5μm)，流动相为甲醇-0.2%磷酸(5∶95)，流速为0.8mL/min，检测波长为268nm，柱温为25℃ 。结果：经过方法学考察，没食子酸含量测定方法具有一定的专属性、准确性、重现性和可行性，样品在0.44~4.4μg范围内呈良好的线性关系，平均加样回收率为100.4%，RSD为0.54%。结论：本方法简便、准确、分离效果好、线性范围宽、灵敏度高，可用于本品的质量控制。 关键词：高效液相色谱法；那如3味丸；没食子酸 中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1673-2197(2008)06-034-02 蒙药那如3味丸由诃子、制草乌、荜茇组成，具消“粘”，消肿，燥“协日乌素”，祛风、止痛、散寒的功效[1]。蒙医理论认为诃子可解草乌毒[2]，并且诃子在本方中占有的比重最大，因此对诃子中化学成分的含量测定尤为必要。诃子中含有大量酸性成分，尤以没食子酸含量居高，因此我们以没食子酸为诃子的定量指标进行含量测定，保证临床用药安全有效。 1 仪器和试药 Waters 2695高效液相色谱仪，包括二级管阵列检测器、进样器、柱温箱；没食子酸对照品(批号：110831-200302，供含量测定用，购于中国药品生物制品检定所)；那如3味丸(内蒙古民族大学附属医院制剂室提供)；所用试剂甲醇为色谱纯，水为超纯水，其它为分析纯。 2 方法与结果 2.1 对照品溶液的制备 准确称取没食子酸对照品1.1mg，置于5mL量瓶中，加甲醇溶解，定容，即得。 2.2 供试品溶液的制备 称取蒙药那如3味丸1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇30mL，密塞，摇匀，超声处理30min，取出，滤过，溶剂蒸干，用甲醇定容至10mL量瓶中，即为供试品溶液。 2.3 阴性对照溶液的制备 按处方比例及制备工艺，制备无诃子的阴性样品，按供试品溶液方法制备。 2.4 色谱条件[3] 色谱柱：Diamonsil-C18(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：甲醇-0.2%磷酸(5：95)；流速：0.8mL/min；检测波长：268nm；柱温：25℃，色谱详见图1。 图1 没食子酸、那如3味丸、制草乌阴性药材的HPLC图 2.5 方法学考察 2.5.1 线性关系考察 分别精密吸取对照品溶液 2.0、6.0、10.0、16.0、20.0μL注入液相色谱仪，测定其峰面积，以峰面积值(Y)作纵坐标，进样量(X)作横坐标，绘制标准曲线，并进行线性回归，得回归方程为：Y=4*10?6x+203329，r=1.0000；结果表明：在0.44~4.4μg范围内，没食子酸的峰面积与进样量有良好的线性关系。 2.5.2 精密度试验 精密吸取对照品溶液10mL，注入液相色谱仪，连续进样6次，依法测定，记录峰面积积分值分别为8020506，8027913，7836674，7864518，7859055，7882866，RSD=1.11%，精密度良好。 2.5.3 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液各10mL，每隔4h分别注入液相色谱仪，依法测定，记录峰面积积分值分别为9825322，9834933，9934211，9335462，9918586，9802296，9882279，结果在24h内峰面积无明显变化，RSD=2.15%。 2.5.4 重现性试验 取同一批号蒙药那如3味丸6份，按供试品溶液项下制备，依法独立测定，计算样品含量，以考察本法的重现性，结果含量分别为4.736mgg-1，4.713mgg-1，4.742mgg-1，4.772mgg-1，4.67mgg-1，4.666mgg-1，平均值为4.717mgg-1， RSD为0.89%，表明重现性很好。 2.5.5 回收率试验：精密称取已知没食子酸含量的供试品6份，每份分别加入没食子酸对照品适量，按“2.2”项方法进行制备，依法测定，计算回收率，结果详见表1。 2.6 样品测定 取三批那如3味丸，按“2.2”项方法制备供试品溶液，按“2.4”项色谱条件进样测定，根据没食子酸的线性回归方程，对蒙药那如3味丸提取液中的成分含量进行计算，结果分别为4.700mg/g，4.655mg/g，4.712mg/g，平均值为4.689mg/g，RSD为0.64%。 3 小结 采用高效液相色谱法测定蒙药那如3味丸中没食子酸的含量，没食子酸在0.44~4.4μg范围内呈良好的