基因Ⅶ型新城疫病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立.pdfVIP

基因Ⅶ型新城疫病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立.pdf

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畜牧兽医学报20lo,41(11):1447一1452 Ac£口V0£Pri咒口ri口e£Zoo£Pc^咒if口Si砣ic口 基因Ⅶ型新城疫病毒荧光定量RT—PCR 检测方法的建立 1,郑东霞1,张 维1,刘文华 孙军峰1’2,刘华雷1,王志亮¨,赵云玲 1,冯莉莉1,常娓娓1 266109) (1中国动物卫生与流行病学中心,青岛 266032;2青岛农业大学,青岛 摘要:根据基因Ⅶ型新城疫病毒F基因裂解位点特征设计一对引物和TaqMan探针,建立一种敏感、特异、重 复性良好的基因Ⅶ型毒株荧光定量RT—PCR鉴别检测方法。以体外转录法制备的cRNA标准品为标准阳性模 板,构建标准曲线,并进行各项指标的检测。结果表明,建立的方法特异性良好,最低可检测到102拷贝·弘L-1的模 该方法能够鉴别检测常规方法不能区分的新城疫病毒基因Ⅶ型强毒株,表明本研究建立的方法可用于此种基因 型毒株的快速鉴别检测。 关键词:新城疫病毒;基因Ⅶ型;荧光定量RT.PcR 中图分类号:S852.659.5 文献标识码:A 文章编号:0366—6964(2010)11—1447一06 Fluorescent RT-PCRfor ofReal—time QuantitatiVeAssay DeVelopment Disease Detectionof Virus(NDV) GenotypeⅦNewcastle NG sUN Hua-leil,Ⅵ,A D。ng_)【ial, Jun_fen91”,UU Zhi-lian矿’,zHAOYun-lin矿,ZHENG Wei-weil ZHANGweil,UUWen-hual,FENGLi.1i1,CHANG (1.吼i触A咒i舢Z 266032,饧i觚;2.Q咒g如DAg矗伽Z£“愆 H阳Z冼n蒯印id跏ioZogy&靠£∥,Q咒鲥口o 266109,既i抛) 踟讹播匆,Qng如o ordertoestablishadifferentialReal—timeRT-PCRwith Abstract:In diagnosis highlysensitivity, of and were to and a according specificityrepeatability,pair primersTaqIⅥanprobe designed characteristicsof site ofF of VⅡNewcastlediseaseVirus cleavagesequencesgenegenotype strainsinthis ThestandardcurvewasestablishedcRNAstandard i咒

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