基因枪介导的海岛棉(Gossypium barbadense L.)茎尖遗传转化体系的建立.pdfVIP

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2017-09-03 发布于北京
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基因枪介导的海岛棉(Gossypium barbadense L.)茎尖遗传转化体系的建立.pdf

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Cotton Science 棉花学报 Cotton Science 2014 , 26 (3) :213-220 基因枪介导的海岛棉(Gossypium barbadense L.) 茎夫遗传转化体系的建立马玲玲，魏延宏，何兰兰，柴蒙亮，朱华国，孙杰，张薇· (石河子大学农学院/新疆兵团绿洲生态农业重点实验室，新疆石河子，832003) 摘要:以新疆海岛棉品种新海 13 号的茎尖为转化受体，采用基因枪介导法，研究 DNA 包裹浓度、微载体种类、前渗处理时间、轰击条件、筛选方法等对茎尖转化的影响，建立了基因枪法介导的海岛棉茎尖转化体系。研究结果表明，采用1.5μgμL-1 DNA 包裹1.0μm 金粉微载体，前渗处理 12 h ，轰击压力为 7.584 MPa 的质粒 1 (1 100 psi) ，轰击距离为 6cm，后渗处理 16 h ，恢复处理 24h，在 120mg.L- 卡那霉素浓度下直接筛选 35 d。在 1 添加 4gL. PCR 和 RT-PCR 检测，共活性炭粒的生根培养基中诱导抗性幼苗生根，获得抗性再生植株。通过得到 5 株转抗除草剂基因 EPSPS 的阳性植株。该研究体系的建立为海岛棉的遗传转化奠定了基础，为海岛棉的育种工作提供了材料。关键词:海岛棉;基因枪法;茎尖;遗传转化中图分类号:S562.035 文献标志码:A 文章编号: 1002-7807(2014)03-0213-08 The Establishment of Biolistics Transformation System of the Apical Meristem of Gossypium barbadense L. Ma Lingling, Wei Yanhong , He Lanlan , Chai Mengliang, Zhu Huaguo , Sun Jie , Zhang We i (Col1ege ofAgricultural, Shihezi UniversiσIOasis Ec o-Agricultural Key Laboratory, The Xinjiang Production and Construction Crops, Shihezi, Xinjiang 832003 , Ch切a) Abstract: In this study, biolistics transformation system was established with apical meristems of Xinhai No .l3, a variety of Gos.与伊ium barbadense L. cultured in Xinjiang. Several factors of the system are studied, which contained the wrapped conωn tration ofDNA , the type of microcarrier, the early penetration processing time , bombardment condition and screening technique , et a1. The optimal transformation system is as follows under oth