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中国畜牧兽医2016，43(3)：622—628
ChinaAnimal Medicine
HusbandryVeterinary
陈千林1，王振宝2，吉尔格力3，刘梦丽1，许正茂1，巴音查汗h
(1．新疆农业大学动物医学学院，乌鲁木齐830052；2．伊犁出入境检验检疫局综合技术服务中心，伊宁835000；
3．巴音郭楞职业技术学院生物工程系，库尔勒841000)
摘要：本试验筛选了新孢子虫病PCR检测的引物，运用《新孢于虫病检疫技术规范》(SN／T3499--2013)对根据
3499
犬新孢子虫Nc2和Nc5基因设计的PCR引物进行了评价。此外，同时运用F1／R1、F2／R2和SN／TF／SN／T
3499
R共同对14份荷斯坦牛和19份西门塔尔牛全血DNA进行PCR检测，旨在筛选出特异性较好的引物，建立
新孢子虫病PCR检测方法和了解当地不同品系牛患新孢子虫病的感染率。结果显示，3对引物分别扩增出105、
3499
128和231 3499F／SN／T
bp目的片段，均与预期目的片段大小相符；其中，F1／R1与SN／T R的最低检测量相
同，为19．9 3499 3499
F／SN／T R引物的敏感性更
fg／uL，F2／R2最低检测量为199fg／uL，说明F1／R1和SN／T
好；运用F1／R1、F2／R2引物分剐对19．9
pg／uL和199fg／tuL模板重复进行4次扩增，均出现了较明亮的扩增条
带，证明两对引物重复性较好。33份血液样品共检出6份阳性DNA，阳性率分别为21．43％和15．79％，检出复合
率为100％。以上结果说明F1／R1和F2／R2引物均可作为新孢子虫病PCR的诊断引物，本试验初步建立了新孢
子虫PCR方法，同时初步了解了当地牛群中薪孢子虫感染情况，为有效预防和控制新孢子虫病提供了科学的理论
依据。
关键词：新孢子虫；新孢子虫病；牛；PCR
7236(2016)0S～0622-07
中圉分类号：$855．9 文献标识码：A 文章编号：1671
the PCR Methodof
EstablishingScreeningDiagnostic Neosporacaninum
BasedonNc2andNc5Genes
CHEN
Qian-linl，WANGZhen—ba02，Jiergeli3，IJUMeng-lil，XU
Medicine 83005
(1．Veterinary
Collegeofxi力iangAgriculturalUniversity，Urumqi
Service Yili
Center andQuarantine 835000，China；
Technique Entry-exit Bureau，Yining
of Inspection
and
Voc
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