基于GFPSCL-tTABcr-abl转基因小鼠建立CML嵌合小鼠模型.pdfVIP

广东药学院学报 }oumal of Guangdong Pharmaceutical University Aug. 2016 ,32( 4) 基于GFP/SCL-tTAlBcr-abl 转基因小鼠建立CML 嵌合小鼠模型 廖芬芳，陈永恒，吴清清，程琳，周晓明，王伟章 (广东药科大学基础学院/广东省生物活性药物研究重点实验室，广东广州 510006) 摘要:目的建立慢性粒细胞白血病(CML) 的转基因嵌合小鼠模型，为靶向白血病干细胞(LSCs) 治疗 CML 的研究提供良好的动物模型。方法 将 Bcr-abl 转基因小鼠与 SCL-tTA 转基因小鼠进行杂交，子代 小鼠再与 GFP 转基因小鼠杂交，PCR 鉴定 Bcr-abl ，t TA 和 GFP 基因三阳性的小鼠( GFP/SCL-tTAl Bcr-abl 小鼠)。通过诱导 GFPISCL-tTAlBcr-abl 小鼠Bcr-abl 基因表达4 周后取其骨髓白细胞移植至经致死剂 量(900 cGy) 辐照的 FVB/N 野生型小鼠。移植3 周后，采用 Westem blotting 检测 Bcr-abl 蛋白表达，流式 细胞术检测小鼠外周血 GFP+ 中性粒细胞的比例以及脾脏和骨髓 GFP+ LSCs 的比例。结果 PCR 结果 显示，GFPISCL-tTAlBcr-abl 小鼠骨髓细胞成功植入 FVB/N 受体小鼠;Westem blotting 检测结果显示，移 植小鼠的骨髓细胞中表达 Bcr-abl 蛋白;流式细胞术结果显示，移植小鼠的外周血 GFP+ 中性粒细胞比例 以及脾脏和骨髓 GFP+ LSCs 的比例明显升高。结论 成功建立了 GFPISCL-tTAlBcr-abl 转基因 CML 嵌 合小鼠模型。 关键词:慢性粒细胞白血病;转基因小鼠; Bcr-abl 中图分类号: R-332 文献标志码:A 文章编号: 1006-8783( 2016) 04-0512-俑 DOI: 10. 16809/ki. 1006-8783.2016050902 Establishment of CML chimeric model by GFP/SCL-tTAlBcr-abl transgenic mice LIAO Fenfang ,CHEN Yongheng ,WU Qingqi吨， CHENG Lin ,ZHOU Xiaoming ,WANG Weizhang (School of Basic Courses αnd Guangdong Province Key Laboratory of Pharmαceutical Bioactive Substances , Guangdong Pharmaceutical University , Guangzhou 510006 , China) Abstract: Objective To establish a chronic myeloid leukemia (CML) chimeric mouse model , and provide a good animal model for the study of CML treatment by eliminating leukemia stem cells (LSCs) . Methods SCL-tTA mice were crossed with Bcr-abl mice , and then the resulting filial generation mice were crossed with transgenic GFP expressing mice. GFP/SCL-tTAl Bcr-abl transgenic mice were identified by polymerase chain reaction (PCR) with GFP, tTA and Bcr-αbl gene-specific primers. Bone maπow cells from GFP/SCL-tTAl Bcr-abl transgenic mice were transplanted into lethally irradiated (900 cGy) FVB/