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茶叶科学 2014 ，34 （5 ）：481~488
Journal of Tea Science 投稿平台：ki net
基于4300 DNA 分析系统的茶树SSR 发掘方法优化与建立
张洁茹，韦朝领*
安徽农业大学 农业部茶树生物学与茶叶加工重点实验室，安徽 合肥 230036
摘要：简单序列重复 （Simple sequence repeats, SSR ）在茶树遗传与育种研究中具有重要的作用，基于 4300
DNA 分析系统的 SSR 发掘具有通量高、准确和灵敏等特点，已被用于许多物种的分子标记研究，但在茶树
4
的相关研究中尚未见报道。本研究应用单因素试验和L (3 )正交设计试验对影响茶树SSR-PCR 的主要参数进
9
行优化，建立了适合于 4300 DNA 分析系统的茶树 SSR-PCR 反应体系：1.0 μL DNA （25 ng ·μL- 1 ），0.2 μL
M13F-F 、0.2 μL R 和 0.4 μL IR-M13F ，0.8 μL dNTPs （25 mmol ·L- 1 ），1.0 μL 10×Buffer （含Mg2+ ），0. 1 μL
Ex-Taq 聚合酶 （5 U ·μL- 1 ），无菌水定容至 10 μL 。所有引物浓度均为 1 μmol ·L- 1 。同时，本研究还证明，可
以以自行配制的6.5%聚丙烯酰胺凝胶溶液（acry ∶bis=29 ∶1）替代4300 DNA 分析系统指定凝胶溶液，检测
SSR 位点。
关键词：茶树；4300 DNA 分析系统；SSR-PCR
中图分类号：S571.1 文献标识码：A 文章编号：1000-369X （2014 ）05-481-08
Establishment a SSR-PCR System of Tea Plant [Camellia
sinensis (L.) O. Kuntze] Based on the 4300 DNA
Analysis System
*
ZHANG Jieru, WEI Chaoling
Key Lab of Tea Plant Biology and Tea Processing, Ministry of Agriculture, Anhui Agricultural University, Hefei 230036, China
Abstract: Simple sequence repeats (SSR) play an important role in genetic and breeding research for tea plant
[Camellia sinensis (L.) O. Kuntze] . 4300 DNA Analysis System is high-throughput, accurate and sensitive in
detecting the signals, it has been used in molecular markers techniques in many species, but its application in tea
plant has not been reported
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