基于16S rRNA作为基因条形码对生鲜肉品物种检测方法的建立及应用.pdfVIP

.60. Animal Husbandη Veterinary Medicine 2015 Vol. 47 No.7 基于 16S rRNA 作为基因条形码对生鲜肉品物种 检测方法的建立及应用 蔡其刚，李秀萍，马利青* (青海省畜牧兽医科学院，青海西宁 810016 ) 摘要:采用并合成了 1 对 16S rRNA 基因通用引物，通过 PCR 方法扩增了牛、羊、鸡、猪4 种动物生鲜肌肉组织的 16S rRNA 基因，建立了 PCR 检测生鲜肌肉组织样品物种来源的检测方法。利用该方法，对采自青海西宁及海西州餐饮市场的30 份所谓牛羊生鲜肉样品进行PCR 检测，均扩 增出约422 bp 长度的 DNA 条带，纯化测序后进行序列分析，发现其中检测出 11 份鲜肉样品为腾品，实为斑嘴鸭 (Anas Poecilorhync加)肉。 16S rRNA 作为条形码基因对生鲜肉品物种的检测具有快速、特异、敏感、准确等优点，可以作为临床上检测生鲜肉品物种的方法进行市场检测。 关键词: 16S rRNA; 基因条形码;生鲜肉品物种鉴定 中图分类号: 5813.23 文献标识码:A 文章编号: 0529-5130(2015)07-0060-04 i普技术[4] 。然而，这些技术却很少在临床上用于物 近年来，包括三鹿奶粉添加三聚氨胶、人造鸡 蛋、用老鼠肉充当牛羊肉及马肉风波等食品安全事 种的鉴定。分子生物学的发展提供了一种新的基于物 种 DNA 序列特定区域的核昔酸序列的多样性方 件，给消费者造成了严重的心理恐慌。这使得人们对 法[5-7] 0 16S rRNA 分子仅在其序列某些位置有少量 于食品的成分越来越重视，然而，商品的标签并不能 保证给消费者提供确切的成分信息。因此，建立鉴定 的核昔酸序列改变，其分子结构高度保守性，这使得 和/或证明食品的成分的方法，以保护消费者和打击 16S rRNA 序列成为较理想的条形码基因用于物种的 非法生产生产者是非常必要的[1] 。 鉴定[8] 。随着核糖体 RNA 数据库的日臻完善， 16S 目前，已经建立很多基于蛋白质分析的物种鉴定 rRNA 序列分析作为生物系统分类的主要依据和有力 方法，例如电泳技术[2] 、免疫分析技术[3] 和液相色 工具已得到广泛认同。 本研究利用已发表 16S rRNA 的保守区域设计的 收稿臼期: 2014-06-26; 修回日期: 2015-04-28 通用引物[剖，成功扩增出牛、羊、鸡和猪的 16S 基金项目:国家绒毛用羊产业技术体系 (CARS-40-08B) rRNA 基因，建立了利用 16S rRNA 作为条形码基因 作者简介:蔡其刚 (1981-) 男，硕士，助理研究员 检测肉物种鉴定的 PCR 方法，并对采自青海西宁及 *通信作者:马利青，研究员，研究方向为动物疫病预防控制， E-mail: mali q67@hotmai l. com 海西州餐饮市场的30 份生鲜肉样品进行了物种鉴定。 [2] 张仲葛，李炳坦，陈效华.中国猪品种志 [M]. 上海:上海 高、配合力好、种质优良等特点，深县猪肌内脂肪含