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江苏农业学报(Jiangsu J. ofAgr. 5ci. ) ,2015 ,31 (1) :87 - 92
87
张 眯,高璐,印伯星,等基于α,酷蛋白特异性的牛乳总蛋白质 ELISA 定量检测方法的建立[J]. 江苏农业学报,2015 , 31
(1) :87-92.
doi: 10. 3969/j. issn. 2015.01.013
基于吨·酷蛋白特异性的牛乳总蛋白质 ELISA 定量
检测方法的建立
张味1 , 高璐1 , 印伯星2 , 苏万业13 , 杨振泉1 , 3 , 顾瑞霄,3
(1.扬州大学食品科学与工程学院,江苏扬州I 225127; 2. 扬州市康源乳业有限公司,江苏扬州 225009; 3. 江苏省乳品生物
技术与安全控制重点实验室,江苏扬州 225127)
摘要: 本研究旨在建立牛乳中总蛋白质的 ELISA 定量检测方法,并评价该方法在牛乳掺假辨识中的应用效
果。首先用 α,酷蛋白标准品免疫新西兰白兔,制备α,酷蛋白特异性抗血清,并建立 α,路蛋白的间接 ELISA 检测
方法,结果显示血清效价为1 : 640 , α,酷蛋白检测的线性范围是25 - 600 nglml ,R2 =0.9995 ,回收率是 96.6% -
10口%。再应用乳成分分析仪,凯氏定氮法和所建立的 ELISA 法测定8 份来源不同的原料乳中总蛋白和 α,酷宣言
白含量,结果显示不同牛乳中总蛋白质含量在0.0292 -0.0298 glml ,风-酷蛋白含量在0.0084 -0. 0092 glml ,占
牛乳总蛋白质的比例恒定,平均为0.3 ,并用该系数建立牛乳中总蛋白质的定量方法。最后对5 份人为兑水稀释、
添加尿素、BSA 和三聚氨腊的模拟掺杂牛乳样品进行检测,测定结果表明基于风-酷蛋白的 ELISA 方法比乳成分分
析仪法和凯氏定氨法具有更高的灵敏性和特异性,含氮添加物对测定结果无显著影响(PO. 05) ,更适合于作为原
料乳及含乳产品中牛乳蛋白质的定量分析。
关键词: 牛乳;αJ酷蛋白; ELISA-;总蛋白
中图分类号: TS252.1 文献标识码: A 文章编号: 2015)01-0087 -06
Establishment of a quantitative ELISA method for detection of total milk
protein based on the specificity of 吨 -casein
ZHANG Mi 1 , GAO Lu 1 , YIN Bo-xing2 , SU Wan_ye 1,3 , YANG Zhen-quan 1,3 , GU Rui-xia 1,3
(1. College of Science and Engineering , Yangzhou University , Yangzhou 225127 , Chinα; 2. Yangzhou Kαngyuα, nDα町Ltd , Yangzhou 225009 , China;
3. Jiangsu Key Laborat町ofDa町 Biotechnology αnd Safety Cont时,v.α昭Zhou 225127 , China)
Abstract: This study aims to establish a ELISA method to quantify the total protein (τP) in milk and to evaluate its
application in identification of the adulterated milk. Here , α, -casein (α, -CN) standard sample was used to immunize
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