基于αs-酪蛋白特异性的牛乳总蛋白质ELISA定量检测方法的建立.pdfVIP

江苏农业学报(Jiangsu J. ofAgr. 5ci. ) ,2015 ,31 (1) :87 - 92 87 张 眯，高璐，印伯星，等基于α，酷蛋白特异性的牛乳总蛋白质 ELISA 定量检测方法的建立[J]. 江苏农业学报，2015 ， 31 (1) :87-92. doi: 10. 3969/j. issn. 2015.01.013 基于吨·酷蛋白特异性的牛乳总蛋白质 ELISA 定量 检测方法的建立 张味1 ， 高璐1 ， 印伯星2 ， 苏万业13 ， 杨振泉1 ， 3 ， 顾瑞霄，3 (1.扬州大学食品科学与工程学院，江苏扬州I 225127; 2. 扬州市康源乳业有限公司，江苏扬州 225009; 3. 江苏省乳品生物 技术与安全控制重点实验室，江苏扬州 225127) 摘要: 本研究旨在建立牛乳中总蛋白质的 ELISA 定量检测方法，并评价该方法在牛乳掺假辨识中的应用效 果。首先用 α，酷蛋白标准品免疫新西兰白兔，制备α，酷蛋白特异性抗血清，并建立 α，路蛋白的间接 ELISA 检测 方法，结果显示血清效价为1 : 640 ， α，酷蛋白检测的线性范围是25 - 600 nglml ,R2 =0.9995 ，回收率是 96.6% - 10口%。再应用乳成分分析仪，凯氏定氮法和所建立的 ELISA 法测定8 份来源不同的原料乳中总蛋白和 α，酷宣言 白含量，结果显示不同牛乳中总蛋白质含量在0.0292 -0.0298 glml ，风-酷蛋白含量在0.0084 -0. 0092 glml ，占 牛乳总蛋白质的比例恒定，平均为0.3 ，并用该系数建立牛乳中总蛋白质的定量方法。最后对5 份人为兑水稀释、 添加尿素、BSA 和三聚氨腊的模拟掺杂牛乳样品进行检测，测定结果表明基于风-酷蛋白的 ELISA 方法比乳成分分 析仪法和凯氏定氨法具有更高的灵敏性和特异性，含氮添加物对测定结果无显著影响(PO. 05) ，更适合于作为原 料乳及含乳产品中牛乳蛋白质的定量分析。 关键词: 牛乳;αJ酷蛋白; ELISA-;总蛋白 中图分类号: TS252.1 文献标识码: A 文章编号: 2015)01-0087 -06 Establishment of a quantitative ELISA method for detection of total milk protein based on the specificity of 吨 -casein ZHANG Mi 1 , GAO Lu 1 , YIN Bo-xing2 , SU Wan_ye 1,3 , YANG Zhen-quan 1,3 , GU Rui-xia 1,3 (1. College of Science and Engineering , Yangzhou University , Yangzhou 225127 , Chinα; 2. Yangzhou Kαngyuα， nDα町Ltd ， Yangzhou 225009 , China; 3. Jiangsu Key Laborat町ofDa町 Biotechnology αnd Safety Cont时，v.α昭Zhou 225127 , China) Abstract: This study aims to establish a ELISA method to quantify the total protein (τP) in milk and to evaluate its application in identification of the adulterated milk. Here ， α， -casein (α， -CN) standard sample was used to immunize