布鲁氏菌种及种内部分生物型快速PCR鉴定方法的建立及应用研究.pdfVIP

史堡邀生堑堂塑鱼壅堂苤查!!!!堡!旦筮箜鲞筮!塑￡!也』丛i!堂堕!些型塑!：坠堕型!翌垫!!：!尘：塑：№：兰 ·133· ．检测技术． 布鲁氏菌种及种内部分生物型快速PCR 鉴定方法的建立及应用研究 李振军 侯雪新 孙渭歌 贾雪 田国忠 【摘要】 目的建讧一步法PCR快速鉴定布鲁氏菌种及种内部分生物型。方法设计6对引 物，建立一步法PCR反应，将布鲁氏菌6个种和种内某些生物型进行鉴定，应用该方法检测了27株 布鲁氏菌参考菌株和239株l临床分离的布鲁氏菌，并与生物学分型方法进行比较。结果通过一步 法PCR能够将待检菌株准确的鉴定到布鲁氏菌种，对于猪种可以定位到生物型和疫苗株；对于牛种 可以鉴定到牛种生物型1、3、4‘j2、5、6、7、9两组生物型；对于羊种可以鉴定到1与2、3两组生物型 和羊种疫苗株。生物学分，鲤方法和PCR方法准确鉴定到种水平的符合率分别为98．33％和100％。 结论一步法PCR是一种快速、特异、简便而低费用的鉴定布鲁氏菌种的分子分型方法。 【关键词】 布鲁氏菌；聚合酶链反应；鉴定 and of chain identificationof Developmentapplicationone-steppolymerasereaction(PCR)forrapid Brucella andsomebiovarsL／Zhen Guo· species jun‘．HoUXue—xin．sUNWei—ge，JIAXue．TlAN DiseasePreventionand InstituteCommuni— zhon罾．+StateKeyLaboratoryforInfectious Contr01．Nationalfor Disease cable Controland Prevention．Beiiing，022砸．China author：TlAN Corresponding Guo—zhong．Email：tianguozhong@icdc．Cn To a PCR for discriminationofsixBrucella 【Abstract】objective assay developone-step rapid andsome biovam．Methods6 of in PCRtodifierentiate species intraspecific Usingpairsprimersone-step sixclassicalBrucella andsomebiovarin PCRinstrument．Thetestedstrains 27 species ordinary including refeFencestrainsofsixBrucella and239BruceUastrainsweI℃estimatedthePCR and species by assaybiolog- icalidentificationmethods．ResultsThesixBrucella couldbe difierentiatedtheone． species precisely by PCR fromthetestedstrains．FivebiovarsandvaccinestrainofB．suis couldbedeter． step assay species