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沈阳农业大学学报，2015，46(5)：532—537
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李丽杰，苏宏，马怀宇，等．山定子(删w Borkh．)根系蛋白质提取及双向电泳技术体系的建立叨．沈阳农业大学学报，
2015，46(5)：532—537．
双向电泳技术体系的建立
李丽杰，苏 宏，马怀宇+，吕德国
(沈阳农业大学园艺学院／辽宁省果树品质发育与调控重点实验室，沈阳110161)
摘
行优化，建立适用于山定子根系的双向电泳技术体系。结果表明：采用Trizol抽提法提取的蛋白质产率最高，可达3．15mg·g_1FW，且其
SDS—PAGE图谱明显优于其他两种方法；选用800斗g的上样量，17cmpH值4～7的IPG胶条和改进后的等电聚焦程序所得到的
二维电泳图谱蛋白点最多，最清晰，分辨率最高。
关键词：山定子；根系；蛋白质；提取：双向电泳
中图分类号：S661．1 文献标识码：A 文章编号：1000一1700(2015)05—0532—06
Establisl吼entofExtractionMethodsandTwo—dimeI峪ionalGel
forProteomicof
ElectrophoresisSystem Analysis
朋切砌s易口cc口缸Borkh．Roots
LILi_jie，SUHong，MAHuai—yu+，L0
De—guo+
of of
hbFmit and
(Coll。geHoniculture瓜ey QualityDevelopmentR。gulation，She“yangA咖culturalUniversity，Shenyang11016l，China)
the
Abstract：F。or o±肘础獬6∞c越n rootsof15一leaVes’肘出瑚6∞cmn wereusedas
pmteomicanalysis Borkh．roots，the Borkh．seedlings
materials．7IotalofmotsweIeextractedthreemethods and7IⅥzolextraction
pmteins by includingTCA—acetone，phenol methods．pHgmdient
ofIPG andisoelectric oftwo—dimensional werealso
strip，sampleloadingquantit)r focusingpammeters electmphoresis(2一DE)system
resultsshowedthatthe andtheSDS—PAGEoftotal extractedTriz01extmctionmethodwere
optimized．The pmteinyield map pmteins by
ofothertwomethods．The extracted extmctionmethodwasFw．
significantlybetterthaIlthat yield
proteinoftotalpmteinsbyTrizol 3．15mg·g_l
In 2一DE withthecombinationof17cm 4—7IPG
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