小反刍兽疫病毒野毒与疫苗毒双重荧光RT-PCR鉴别检测方法的建立.pdfVIP

小反刍兽疫病毒野毒与疫苗毒双重荧光RT-PCR鉴别检测方法的建立.pdf

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中国动物传染病学报2016,24(4):3l-35 ChineseJoumalofAnimalInfectiousDiseases ·研究论文· 小反刍兽疫病毒野毒与疫苗毒双重荧光RT-PCR 鉴别检测方法的建立 何世成1,邹玖零2王卫国1,王昌建1,唐小明1,林源1,鲁杏华1,邱立新1 des ruminants 摘要:对GenBank中的小反刍兽疫野毒(Peste virus,PPRV)及疫苗毒株的基因序列进行分析,设计两对引 petits 物和两条特异探针,建立小反刍兽疫病毒野毒与疫苗毒株的双重荧光RT-PCR鉴别检测方法。特异性检测表明,建立的双重荧 (3.576 ng/mL),VIC通道可检测到10。3稀释度自dRNA(27.6ng/mL)。重复性实验表明,该双重荧光RT-PCR方法重复性较好。 用建立的二重荧光RT-PCR方法对20份组织样品进行检测,结果显示,该方法可以有效区分野毒和疫苗毒株,且野毒检测结果与 实验室确诊阳性结果一致,可以用于l临床检测。 关键词:小反刍兽疫病毒;野毒;疫苗毒;荧光RT-PCR;鉴别 中图分类号:$852.659.5 文献标志码:A DUALFLUoRESCENCEIU乙PCRFOR DEVELOPMENTOF PESTE DIFFERENTIATIoNoFWILDSTRAINANDVACCINESTRAINoF DESPETITSRUMINANTSVlRUS HE Yuanl, Jiu.1in92,WANGWei—gu01,WANGChang_jianl,TANGXiao—ruin91,LIN Shi.chen91,ZOU LU Li.xinl Xing.hual,QIU and andControlCenter DiseasePrevention (1.AnimalDiseasePrevention 410014,China;2.Animal ofHunanProvince.Changsha ControlCenter 425000,China) 0,Yongzhou,Yongzhou onthe ofwildisolatesandvaccinestrain Abstract:Twoof andtwo were based specific designed genomesequences pairsprimers probes in dualfluorescenceRT-PCRwas for ofPestedes ruminants developed petits virus

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