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第 6 卷 第 10 期 食 品 安 全 质 量 检 测 学 报 Vol. 6 No. 10
2015 年 10 月 Journal of Food Safety and Quality Oct. , 2015
小麦球蛋白单克隆和多克隆抗体制备及建立
酶联免疫吸附法快速检测技术
1, 2 3* 2 2 3 3
赵 凯 , 贾彦博 , 王 啸 , 丁枫芸 , 肖海龙 , 黄建萍
(1. 浙江大学生物系统工程与食品科学学院, 杭州 310058; 2. 杭州市质量技术监督检测院, 杭州 310019;
3. 杭州市食品药品检验研究院, 杭州 310022)
摘 要: 目的 建立小麦球蛋白的 ELISA 检测技术, 用于蛋白质掺假以及过敏原成分的快速检测。方法 从麦
胚粉中提取球蛋白, 抗原免疫 Balb/c 小鼠进行 4 次免疫后, 通过脾脏细胞杂交瘤技术及间接 ELISA 筛选制备
单克隆抗体, 同时制备兔抗小麦球蛋白的多克隆抗体。通过棋盘滴定法, 初步确定单克隆抗体和多克隆抗体的
最佳工作浓度, 建立双抗夹心 ELISA。结果 通过免疫和杂交瘤技术获得了抗小麦球蛋白的单克隆抗体, 纯化
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后抗体的效价均达到 1:10 , 通过免疫兔制备的多克隆抗体经纯化后效价在 1:2.4×10 左右, 所建立的双抗体夹
心 ELISA 方法最低检测限为 10 ng/mL, 与其他物种的蛋白不发生交叉反应。结论 本文建立的双抗体夹心
ELISA 方法具有良好的特异性和灵敏度, 为建立乳品中小麦成分掺假及过敏原成分快速检测提供理论依据。
关键词: 小麦球蛋白; 单克隆抗体; 多克隆抗体; 酶联免疫吸附法
Study on monoclonal antibody and polyclonal antibody preparation and
establishment of ELISA detection method of wheat globulin
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ZHAO Kai , JIA Yan-Bo , WANG Xiao , DING Feng-Yun , XIAO Hai-Long , HUANG Jian-Ping
(1. School of Biosystems Engineering and Food Science, Zhejiang University, Hangzhou 310058, Ch
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