小牛肠碱性磷酸酶活性检测方法的建立.pdfVIP

ofAnhui 安徽农业科学，Journal Agri．Sci．2014，42(18)：5870—5873 责任编辑陈玉敏责任校对况玲玲 小牛肠碱性磷酸酶活性检测方法的建立 赖晓芳，林霖，李意，5,1奕雄，兰全学，赖心田，杨国武+(深圳市计量质量检测研究院，广东深圳518131) 摘要 [目的]建立适用于科研用小牛肠碱性磷酸酶活性的检测方法。[方法]通过模拟科研中小牛肠碱性磷酸酶的使用条件及缓冲 液，并研究不同底物浓度、反应时间、显色时间、缓冲液pH等对酶活性检测的影响。[结果]使用不同缓冲液对酶活性进行检测，其测量 值差异较大。若使用添加硼酸的铁氰化钾溶液，则可以实现颜色的稳定显示。最佳水浴时间为10min，最佳底物浓度为0．04mol／L。 随着温度的增加，对低浓度酶活性的影响不大，但对高浓度酶活性的影响逐渐增大。当缓冲液pH为7．0—8．0时，能够较好维持酶活性 的稳定性。缓冲液粒子强度对酶活性的影响不大。[结论]成功建立了科研用小牛肠碱性磷酸酶的活性检测方法。 关键词碱性磷酸酶；小牛肠；活性检测；紫外分光光度法；科研 中图分类号S852．2文献标识码A 文章编号0517—66ll(2014)18—05870—04 Establishmentof DetectionMethodofCallIntestineAlkaline Activity Phosphatase LAI Guo-咖et of Xiao-fang，YANGal(ShenzhenAcademyMetrology＆QualityInspection，Shenzhen，Guangdong518131) Abstract Theresearchaimedtoestablishthedetectionmethodofthe ofalkaline forscientificresearch． 『Obiective activity phosphatise 1 ne conditionsbufferofcalfintestine inthe weresiredatedandtheeffectsofdif- 『Method and alkaline scientificresearch using phosphatise ferentsubstrate andotherfactorsonthedetectionof werestudied． concentration．reactiontime．colorationtime，bufferpH enzymeactivity 『Resuit]Differentkindsofbufferhad effectsonthe ofalkaline solutionwith greater activity phosphatise．Whenpotassiumferricyanide adding besttime was10 thebest concentrationwas0．04mol／L． boracicacidwasused．thecolorationwasstable．The ofwaterbath minand substrate Asthe effectsonthe ofalkaline atlowcrconcentrationswas jtseffectsonthe of temperatureincreased．its activity phosphatise little，but activity alkaline at concentrationswere the ofbufferwas7．0～8．0．the ofthe ofalkaline ph