c-Cbl、Cbl-b在结直肠癌组织中的表达和其临床意义.pdfVIP

·中文论著摘要· c．Cbl、Cbl．b在结直肠癌组织中的表达及其临床意义 目 的 结直肠癌是世界范围内最常发生的恶性肿瘤之一，在我国其发病率和死亡率 逐年升高，目前死亡率已跃居恶性肿瘤第2位。尽管确诊时70．80％的患者可以进 行根治性手术切除，但总体的5年生存率仍只有50．60％。约2／3接受过根治手术 的患者发生复发或远处转移，常见的转移部位有：肝脏、肺、骨、脑、肾上腺， 为血行转移所致。因此，全身化疗既是早中期结直肠癌术后辅助治疗的主要手段， 也是晚期结直肠癌姑息治疗的主要手段。近年来，随着肿瘤分子生物学研究的深 入，为肿瘤的药物治疗提供了分子靶向治疗这种新模式。分子靶向治疗制剂因其 高效低毒的特性，越来越引起临床医师的重视，目前的研究大多集中在与细胞生 长、分化和凋亡调控机制相关的信号传导途径。 c．Cbl和Cbl．b是Cbl(CasitasB-lineagelymphoma)家族的重要成员，Cbl是在 进化上相对保守的一类广泛分布的细胞内蛋白，Cbl蛋白中含有多个不同的结构 域，在细胞的活化过程中可作为接头蛋白或支架蛋白参与信号转导；同时由于Cbl 型E3)重要的一员。通过TKB及其他结构域识别并结合靶蛋白，RING结构域募 集泛素结合酶E2，从而启动泛素化降解途径。参与细胞内信号转导的负向调控， 这对于维持细胞的内稳态具有重要作用。 c．Cbl、Cbl．b在结直肠癌中的表达，及其与临床病理因素和生存的相关性研 究在国内外报道较少。 本研究构建了结直肠癌组织芯片，应用免疫组化SP法，检测c．Cbl和Cbl．b 蛋白在结直肠癌中的表达情况，并分析其与结直肠癌临床病理特征的关系以及对 生存的影响，旨在探讨c．Cbl和Cbl．b在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。 材料和方法 一、组织标本 中国医科大学附属第一医院和辽宁省肿瘤医院2005年8月至2006年6月手 术切除的结直肠癌组织标本128例，术前未行放疗、化疗及免疫治疗。其中男性 5例无法评价分化程度)，分为低级别结直肠癌和高级别结直肠癌2组，其中低级 别组包括：高分化(管状)腺癌，中分化(管状)腺癌，乳头状腺癌，共108例： 高级别组包括：低分化(管状)腺癌，粘液腺癌，共15例。结直肠癌分期采用美 为89例，T4为18例；发生淋巴结转移46例；发生远处转移5例；I期患者14 例，II期患者67例，III期患者42例，Ⅳ期患者5例。 二、试剂 鼠抗人c．Cbl单克隆抗体购自BD公司；鼠抗人Cbl．b单克隆抗体购自 有限公司。 三、方法 将128例结直肠癌标本制作成组织芯片，采用免疫组化SP法，按照SP检测 试剂盒说明书所示步骤进行。 四、免疫组化结果判断 c-Cbl、Cbl．b均以胞膜和／或胞浆出现棕黄色颗粒为阳性染色，于显微镜400 倍视野下随机选取5个有代表性的不同区域，每个视野的得分由阳性细胞的比例 和显色强度两方面决定，依照阳性细胞比例：≤5％、6-25％、26．50％、51．75％、 ／76％分别得0分、1分、2分、3分、4分；依照显色强度：未着色、浅黄色、 棕黄色、棕褐色分别得0分、1分、2分、3分；将两项得分相乘得到该视野的最 终得分，选取的5个视野得分的平均值为最后得分。最后该切片按照得分分为以 表达，㈩～(卅)为阳性表达。 五、统计分析 2 0．05为差异有统计学意义。 实验结果 一、c-Cbl，Cbl．b的表达情况 直肠癌标本中有92例Cbl．b高表达，阳性率为71．7％； 二、c-Cbl，Cbl．b的表达与临床及病理因素之间的关系 经相关性统计分析显示c．Cbl的表达与性别、年龄、分化程度、浸润深度、 临床分期以及淋巴结转移等病理因素无显著相关性(尸0．05)；而Cbl．b的表达与 组织学分级呈负相关(，．=．0．204，P=0．024)，与性别、年龄、浸润深度、临床分 期以及淋巴结转移等病理因素无显著相关性(PO．05)； 三、c-Cbl，Cbl．b的表达与生存的关系 截止时间为2011年9月，在128例患者中有共有43例完成了随访，其中死 亡19例，存活24例，死亡率为44．2％。c．Cbl阳性组患者生存率为60．O％，阴性 组患者生存率为52．2％，阳性组略高于阴性