e-钙粘蛋白基因启动子区异常甲基化及子宫中肌瘤的关联研究.pdfVIP

目 录 中文摘要………………………………………………………………………】 英文摘要……………………………………………………………………．4 英文缩写………………………………………………………………………7 研究论文E．钙粘蛋白基因启动子区异常甲基化与子宫肌瘤的关联研究 —L上．—L 日U舌………………’……………………………。……………………-…8 材料与方法………………………………………………………………9 结果……………………………………………………………………．15 附图……………………………………………………………………．17 附表……………………………………………………………………．19 讨{会……………………………………………………………………．21 结{仑……………………………………………………………………．24 参考文献………………………………………………………………．25 综述子宫肌瘤及其相关遗传……………………………………………·29 致谢…………………………………………………………………………．45 个人简历……………………………………………………………………．46 万方数据 中文摘要 E．钙粘蛋白基因启动子区异常甲基化与子宫肌瘤的关联研究 摘 要 目的：子宫肌瘤是妇女在生育年龄最常见的肿瘤，其发生率约为20 30％。虽然子宫肌瘤是良性肿瘤，但是它可以导致女性月经出血过多、慢 性盆腔痛、反复流产、不孕等。子宫肌瘤的确切发病机制到目前仍不清楚。 有研究表明子宫肌瘤的发生和发展与一些肿瘤抑制基因的异常表达相关， 例如：T—cadherin、p53、KLFl 的失活或者功能缺失可能是形成子宫肌瘤的原因之一。 E．钙粘蛋白是一个重要的肿瘤抑制基因，属于细胞表面糖蛋白家族中 的一员，它可以维持同质细胞间的粘附和保持组织结构的完整性。大量研 究表明，E．钙粘蛋白的异常表达与许多上皮性肿瘤的侵袭和转移有关，包 括子宫内膜癌、子宫颈癌、卵巢癌和肉瘤等。另外，E．钙粘蛋白的异常表 达在一些良性侵袭性疾病的发生和发展中也起着重要作用。如：E．钙粘蛋 白表达的缺失是子宫内膜异位症中异位内膜转移的先决条件。有关E一钙 粘蛋白与子宫肌瘤的研究还少有报道，Matsuzaki等发现患有子宫肌瘤的 不孕妇女的分泌中期内膜E一钙粘蛋白表达明显升高。 E一钙粘蛋白的异常表达与E．钙粘蛋白基因(CDHl)基因突变、等位 基因的缺失以及基因启动子区甲基化有关。积累的研究表明CDHl基因 启动子区甲基化是导致其在肿瘤中转录失活的重要分子机制。甲基化对启 动子区的活性有明显的降低作用，进而可以导致E．钙粘蛋白表达下调甚 至失活，从而引起肿瘤的发生、侵袭和转移。 本研究拟在探讨CDHl基因启动子区甲基化与子宫肌瘤发病的关系， 目的在于从表观遗传学上更为深入地探究子宫肌瘤的发病机制，也为临床 上治疗该疾病提供新的靶点。 方法： 1～ 院妇科因子宫肌瘤就诊并接受手术的患者102例，患者的年龄段为3 58岁(平均年龄47．67士4．51岁)。术后经病理证实均为子宫肌瘤，无恶变。 对照组：收集在河北医科大学第四医院同期因宫颈上皮内瘤变III级 万方数据 中文摘要 均年龄44．90+8．49岁)。均经病理证实是正常子宫内膜组织。以上标本收 集均在经过患者知情同意后进行。 2实验步骤 2．1标本处理：病例组与对照组标本离体后，即刻浸泡在事先准备好的 RNA later液中，并马上转移到4。C冰箱中过夜，然后放在一20℃冰箱中贮 存以备用。 2．2DNA提取：将病例组与对照组组织标本各取出50．100mg，分别进行 组织研磨，提取组织DNA。 2．3E．钙粘蛋白基因启动子区甲基化状态的检测：利用甲基化特异性PCR 技术(MSP)检测所有标