EGFR单克隆抗体C225对鼻咽癌细胞放疗增敏作用的实验探究.pdfVIP

EGFR单克隆抗体C225在鼻咽癌放疗增敏的实验研究 摘要 【目的】通过对鼻咽癌cNE．2z细胞株不同处理，观察其凋亡及EGFR信号通路 蛋白表达的变化，初步探索C225对鼻咽癌的放疗增敏作用及其可能的相关机制。 【方法】 工作浓度的测定 blot法测鼻咽癌CNE．2Z细胞株EGFR的蛋白表达情 1．1免疫细胞化学法和Wbstem 况 1．2MTT法测定C225在体外细胞试验中工作浓度 2．C225对鼻咽癌CNE一2Z细胞株放射敏感性的影响 2．1体外培养克隆形成实验观察鼻咽癌CNE．2Z细胞株的存活分数 2．2 A衄exin．V／PI双染法观察鼻咽癌CNE．2Z细胞株凋亡的变化 2．3Westem blot法观察鼻咽癌CNE-2Z细胞株EGFR和pAkt蛋白表达的变化 【结果】 1．1免疫细胞化学法和Westernblot法测鼻咽癌CNE一2z细胞株 EGFR的表达 免疫细胞化学法和Westemblot法检测发现CNE．2Z细胞株EGFR呈高表达水 平。 1．2MTT法测C225工作浓度的结果 生长抑制率(IC)=(对照组OD值一实验组OD值)／对照组OD值×100％， 中的工作浓度。 2．1体外培养克隆形成实验观察cNE一2z细胞株的存活分数 C225联合放疗组每个剂量点细胞的存活分数明显低于单纯放疗组，计算得 著低于单纯放疗组SF2(O．789±0．0201)％。 2．2Annexi n_v／P l双染法观察鼻咽癌cNE一2z细胞株凋亡的变化 放疗前用药组的细胞凋亡率为(31．1士0．24)％，放疗后用药组的细胞凋亡率 的细胞凋亡率为(6．8士0．95)％，未处理组的细胞凋亡率为(2．8±O．51)％，放 疗联合用药组的细胞凋亡率明显高于单纯处理组和未处理组(P0．05，n-3)。 2．3WesternbI 达的变化 单用C225组EGFR和pAln蛋白表达较对照组明显下降；与单纯放疗组比较， 蛋白表达较对照组有所升高。 【结论】 C225具有放疗增敏作用，其机制涉及到C225联合放疗增强了单纯放疗诱 导的细胞凋亡；并且推测其凋亡增加可能与C225抑制EGFR的表达和功能， 进而抑制EGFR．P13K．Akt信号转导通路有关。 【关键词】 鼻咽癌；EGFR；c225；细胞凋亡；pAkt Theresearchofenhancementof翰diosensitiVi坶byC225on carcinomaCNE一2ZceULine nasopha眄nageal Abstract 【OBJECTIVE】 the carcinoma(=lqE-2Zcelllinedifrerent 111：roughn邪ophaD，nageal treatment， we tlle of andthe ofEGFR锄d observe expression pAkt． ch髓gestheir印opotosis Tlle is t0 龇 e髓ctofC225onmc objectionexpIore mdiosensitiV时of carCinomaandits佗latedmechallisms． n勰0pharynageal 【METHODS】 2 1．The ofEGFRof carcinomaCNE一2Z expression nasopharynageal ce¨Iineand1’odetectthe concentrationin working