ERK通路及丙泊酚后处理大鼠的脑保护作用.pdfVIP

ERK 通路与丙泊酚后处理大鼠的脑保护作用 摘 要 目 的 本实验探讨丙泊酚后处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后空间学习记忆能力 的影响， 及丙泊酚后处理对抗大鼠脑缺血再灌注损伤与ERK1/2通路的关系。 方 法 1、线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注（MCAO）模型，将大鼠随机分为 四组（n=40）。假手术组（SH）：做颈部切口分离左侧颈总动脉挂线不结扎；缺血 再灌注组（I/R）：即 MCAO模型组；丙泊酚后处理组（Pro）；侧脑室注射PD98059 丙泊酚后处理组（PD）。各组均于模型建立（或假手术）前 30min 侧脑室注射 PD98059 或 DMSO 溶液，于再灌注即刻（或假手术后）用腹腔注射丙泊酚或生理 盐水。检测各组大鼠再灌注 24h 的神经缺陷评分和脑梗死体积比，并行 HE 染色 观察海马神经元损伤程度，免疫组织化学方法检测海马CA3区磷酸化ERK(p-ERK） 与 Fos 的表达， RT-PCR 法检测海马 ERK1 与 ERK2 mRNA。采用 Morris 水迷宫检 测再灌注后7天大鼠的空间学习记忆能力。 结 果 1. HE 染色结果显示，SH组海马椎体细胞呈层状分布，细胞排列较整齐， 核仁与核膜部分清晰明了；I/R组海马椎体细胞层数减少，细胞排列错乱，细胞 数量减少，胞核固缩、胞浆浓缩的现象较明显，细胞呈多角形或极不规则的形态， 细胞内部的组织结构不清晰。Pro组海马椎体细胞排列较I/R整齐，细胞数目较 I/R组增加，胞浆浓缩和胞核固缩深染现象等得到一定的改善；PD组染色结果与 I/R组相似。 2. SH 组无神经缺陷症状，也无脑梗死灶；Pro 组神经缺陷评分和梗死灶明显小 于I/R组，有显著性差异(P0.05)。PD组与I/R组比较差异无显著性（P0.05）， 与Pro组比较明显增加，差异有统计学意义(P0.05)。 3. SH 组海马组织 ERK1/2 mRNA 表达水平在所有各组中最低(P0.05);其余三组 间ERK1/2 mRNA表达水平差异无统计学意义（P0.05）。 4. SH组p-ERK和Fos表达水平在所有各组中最低(P0.05); Pro组较I/R组与 PD组表达水平明显升高(P0.05)；PD组与I/R组比较差异无统计学意义 （P0.05）。p-ERK与Fos的表达呈正相关性关系(r=0.992,P0.05)。 5. Morris水迷宫：①、定向航行实验：4组大鼠平均逃避潜伏期均呈递减趋势。 I/R组与PD组最长，SH组最短，Pro组居中（P 0.05）；4组大鼠搜索平台有效 4 运动策略构成比 SH 组最高，Pro 组次之，I/R 组及 PD 组最低，差异有统计学意 义（P 均0.00714），I/R 组与 PD 组间差异无显著意义（P0.00833）；②、空间 探索实验：Pro组和I/R组目标象限活动时间和穿越平台次数比SH组明显减少； Pro 组大鼠的目标象限活动时间和平台穿越次数均较 I/R 组与 PD 组明显增加， 差异有显著性(P 0.05)；PD组与I/R组比较差异无显著性（P0.05）。 结 论 1、丙泊酚后处理可以改善大鼠脑缺血再灌注后神经缺陷症状，使脑梗死 体积减少，并可改善大鼠脑缺血再灌注损伤后的学习功能障碍，使大鼠的空间记 忆能力得到一定的恢复； 2、丙泊酚与 ERK 通路之间存在着一定的联系，脑缺血再灌注损伤可以进一步激 活ERK通路，刺激即早基因c-fos的转录表达而促进神经元损伤的修复及恢复神 经元的正常功能； 关键词 细胞外信号调节激酶；丙泊酚；后处理；脑缺血再灌注；水迷宫