FasFasL在酒精性肝炎肝纤维化发病及进展中作用及机制研究.pdfVIP

中文摘要 Fas／FasL在酒精性肝炎／肝纤维化发病与进展中 作用及机制研究 摘 要 liver 目的：酒精性肝病(alcoholic 饮酒而导致的肝脏损害，包括单纯脂肪肝、酒精性肝炎及肝纤维化、肝硬 化【l】。酒精性肝炎(alcoholic liver 炎症为主要特征，进一步导致肝硬化，并是肝细胞癌的致病因素之一。肝 细胞凋亡是多种炎症性肝损伤的病理表现，其由多种细胞因子参与的外源 性与内源性凋亡信号通路激活致肝实质细胞程序性死亡、进而可诱发肝脏 炎症及纤维化。Fas／Fas配体(Fas 主导基因调控系统之一，我们的前期研究发现，Fas／FasL系统在非酒精性 脂肪性肝炎的发生及发展过程中起着重要的作用，但其在酒精性肝炎、肝 纤维化发病及进展中细胞凋亡的作用及调节机制尚不清楚，针对细胞凋亡 信号转导通路中的靶基因调控药物及基因治疗措施亦亟待探讨。本研究旨 在探明酒精性肝炎、肝纤维化中Fas／FasL系统及其下游相关基因表达的 变化及其在该病进展中的作用，以进一步阐明酒精性肝病的发病机制，为 该病的治疗提供新的途径及科学依据。 酒精性肝炎、酒精性肝纤维化模型，以等热量麦芽糊精代替酒精喂养小鼠 作为对照组。造模完成处死动物，留取血清及肝组织标本，部分肝组织用 4％中性甲醛固定，其余肝组织以液氮快速冷冻，．80。C保存备用。血清丙 氨酸氨基转移酶(alanine AU 移酶(aspartate 2700全自动 生化分析仪酶法测定。肝组织切片采用HE染色观察肝脂肪变、炎症活动 及纤维化程度；Masson染色观察肝纤维化程度。脱氧核糖核苷酸末端转 transferase 移酶介导的缺口末端标记法(terminal mediated deoxynueleotidyl nickend Western 中文摘要 necrosis (tumor 3)及细胞色素P4502El (cysteineaspartate．specificproteases3，caspase P450 2El，CYP2E1)mRNA及蛋白表达。实验数据以均数 (Cytochrome 土标准差(舅土s)表示，采用SPSS13．0统计软件进行单因素方差分析，用 least 最小显著差-t(thesignificant PO．05为差异有统计学意义。 注射可快速建立小鼠酒精性肝炎、肝纤维化模型，且造模方法简单易行， 动物死亡率低，模型稳定性好，可作为酒精性肝纤维化研究的实验支撑模 型。肝细胞凋亡数随肝脏炎症及纤维化的加重而增高，并伴有凋亡相关基 因表达增强，对照组、酒精性肝炎组、酒精性肝纤维化组小鼠凋亡相关基 因表达水平依次升高(PO．05)。 1．实验小鼠一般情况对照组小鼠毛发有光泽，体态活泼，饮食及大 小便正常；酒精性肝炎组、酒精性肝纤维化组小鼠精神不振，饮食量减少， 皮肤弹性差，毛发稀疏。 2．实验小鼠血清生化学改变随造模时间延长，酒精性肝纤维化组小 鼠血清ALT和AST水平显著高于酒精性肝炎组及对照组(PD．05)。 3．实验小鼠肝组织病理学变化肝组织切片HE及Masson染色显示， 4周，可见轻～中度肝细胞大泡性脂肪变及肝细胞水样变，小叶内点、灶 状坏死伴炎细胞浸润；喂养8周，，点灶状肝细胞坏死及炎细胞浸润加重， 并可见片状肝细胞坏死，窦周及中央静脉周围纤维组织沉积，汇管区扩大，