中空纤维酶膜反应器制备L-蛋氨酸的的分析研究.pdfVIP

中文摘要 本文采用分体式中空纤维酶膜反应器，利用游离氨基酰化酶对N．乙酰．DL． 蛋氨酸进行了拆分，并对拆分液进行了分离。包括以下内容： 游离氨基酰化酶动力学理论分析。考察了底物浓度、产物浓度对拆分反应的 影响，并用非线性法和L．B法对实验数据进行了拟合。结果表明：在实验所用底 没有出现底物抑制。两种产物均对拆分反应有抑制作用，L．蛋氨酸为竞争性抑制， 非线性法拟合出的参数值更优。 游离氨基酰化酶热失活动力学研究。推导了该酶热失活过程的三态模型，并 对模型作了简化，通过测定不同温度下，酶的比活随时间的变化，对实验数据进 行了拟合。结果表明：氨基酰化酶的热失活符合简化模型，即一级衰减模型。得 到失活速率常数k=5．7×1016 exp(12903．2／n。 用分体式中空纤维酶膜反应器对底物进行了拆分研究。考察了不同底物浓 度、底物停留时间对稳态时转化率以及产物产率的影响，并对该反应体系进行了 数学模拟。结果表明：在实验条件下，底物浓度为0．05mol／L，停留时间为5小 时，结果较好。在低底物浓度下，修正的米氏方程能够较好的描述反应行为，而 在高底物浓度下，出现了较大的偏差，需对方程作进一步的修正。 对拆分后的溶液进行了分离研究。结果表明：在V为50--350ml之间的收 集液用于浓缩结晶获得N．乙酰．D．蛋氨酸；在V为350--．1000ml之间的收集 液用于浓缩结晶获得L．蛋氨酸。在上柱过程中，60。C左右的热水即可将L．蛋氨 酸洗出，成本低廉且不造成化学污染，而简单的酸洗即可使Na+树脂柱再生，因 此较低的成本有利于L．蛋氨酸的制备。 关键词： 游离氨基酰化酶，动力学，热失活，酶膜反应器，拆分液 ABSTRACT The recirculatedhollowfiber membranereactorwas enzymatic usedwith free forthe resolutionof and aminoacylaseoptical N—acetyl-DL—Methionine resolvedsolutionwas separated． Theoriesoffree were determinethe aminoacylasedynamicsanalyzed．To effectsofsubstrateconcentrationand concentrationonthe product optical werecarriedout．Both resolution，experiments non．1inearandL．Bmethods wereusedtofitwiththe data．The experimentalresultsshowedthatinthe substrateconcentrationusedinthe of experimental 0-0．24mol／L，the scope resolutionwas withthe consistentMichaelis．Mentenconstantof equation；the Michaelis-Mentenwas0．985mmol／Land therewasnosubstratein