沉默信息调节因子及自噬在肢体缺血再灌注致心肌损伤的机制研究及七氟醚干预效应.pdfVIP

1Ⅲ删4吣4呲1帆4叫 1籼q籼2㈣9 目录 一、缩略词表………………………………………………………一(1) 二、中文摘要………………………………………………………(2) 三、英文摘要…………………………………………………………(4) 四、前言…………………………………………………………………(7) 0) 五、材料与方法……………………………………………一(1 六、结果………………………………………………………………(17) 七、分析与讨论……………………………………………………．(21) 八、结论…………………………………………………………………f23) 九、参考文献……………………………………………………．．(24) 十、附录……………………………………………………………………(28) 十一、致谢…………………………………………………(29) 十二、综述…………………………………………………(30) 十三、独创性声明…………………………………………………．．(39) 3 万方数据 缩略词表 万方数据 沉默信息调节因子与自噬在肢体缺血再灌注 致心肌损伤的机制研究及七氟醚的干预效应 中文摘要 目的：观察肢体缺血再灌注造成心肌细胞形态学变化及凋亡情况，Sirtl和 自噬相关蛋白LC．3的蛋白表达，探索Sirtl和自噬在肢体缺血再灌注致心肌损伤 中的作用机制，及七氟醚对心肌的保护作用。 组(甩=7)：假手术组(S组)，肢体缺血再灌注组(IR组)，肢体缺血再灌注 组(NAM+3．MA组)。 每组大鼠予正常饮食和水饲养7天，NAM组和NAM+3．MA组术前7天每 1．5ml／kg的生理盐水。 假手术组(S组)：使用4％的水合氯醛6ml／kg维持麻醉至无体动反应后行 气管插管，机械通气，仅钝性分离双侧腹股沟三角处动脉不予夹闭。 肢体缺血再灌注组(IR组)：麻醉后气管插管，采用无创动脉夹双侧夹闭 股动脉缺血4小时，再灌注4h的方法制作模型。 肢体缺血再灌注预处理组(IPR组)：股动脉夹闭前30分钟实施缺血5分 钟，再灌注5分钟，循环3次后余同I／R组。 实验结束后取心尖部组织制备石蜡标本，石蜡标本切片后行HE染色观察细 胞形态和TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况，另取心尖部组织免疫印记法检测 Sinl和LC．3蛋白的表达情况。 结果： 1．大鼠心肌Sirtl与LC3．II／LC3．I蛋白表达情况 2 万方数据 Sirtl表达差异无明显统计学意义(胗0．05)。 与S组相比， 表达上调(PO．05)。 2．TUNEL法测细胞凋亡结果 细胞凋亡比例明显增高(尸0．05)；与IR组相比，IPR组、Sev组细胞凋亡降低 细胞凋亡比例增高(尸0．05)，NAM+3．MA组细胞凋亡差异无明显统计学意义 3．HE染色结果 S组心肌纤维排列整齐，细胞界限清晰，心肌间质无或仅有少量中性粒细胞 渗出；IR组细胞界限不清，心肌细胞出现颗粒变性、空泡变性，胞浆疏松透明， 部分心肌纤维断裂，心肌间质较多中性粒细胞和红细胞浸润。IPR组心肌纤维排 列整齐，细胞界限模糊，心肌间质仅有少