碘致NOD.-2h4小鼠自身免疫性甲状腺炎microRNAs的表达变化.pdfVIP

·中文结构式摘要· 碘致NOD．H．2h4小鼠自身免疫性甲状腺炎 microRNAs的表达变化 目 的 自身免疫性甲状腺炎(Autoimmune 病(Autoimmunedisease，AITD)的一种，在人类中主要表现为桥本甲状腺 thyroid 炎(Hashimoto thyroiditis)、产后甲状 thyroiditis，HT)、萎缩性甲状腺炎(Atrophy 腺炎(Postpartumthyroiditis，PPT)和无痛性甲状腺炎(painlessthyroiditis)，病理 特点主要为甲状腺内可观察到大量淋巴细胞浸润、甲状腺滤泡组织破坏，HT患者 血清中出现甲状腺自身抗体如TPOAb和TgAb，进而出现甲状腺纤维化或萎缩，伴 有甲状腺功能减退。 目前认为，在AIT疾病中，免疫细胞(特别是T、B细胞)的异常是其免疫学 病因基础。在未知的遗传和环境因素的共同作用下，免疫细胞针对自身抗原的耐 受被打破，从而产生特异性抗体，导致疾病发生及发展。已认为的机制包括辅助 功能缺陷、Thl7异常、自身反应性T细胞、B细胞克隆扩增、调节性B细胞(Breg) 功能缺陷等等。 同时，其他自身免疫性疾病中CD4+T细胞的研究也在不断深入。有研究指出， 在类风湿性关节炎(Rheumatic 单核细胞、滑膜细胞接触相互作用形成功能网络后，释放IL．1、TNF．Q、IL．17等 促炎症因子，引起滑膜细胞增殖及骨质破坏。 根据上述研究，我们有理由认为AIT中甲状腺滤泡细胞间浸涧的CD4+T细胞 在AIT炎症的发展阶段中发挥了重要作用，而且很有可能是由于CD4+T细胞内某些 胞内调控蛋白的表达异常改变了CD4+T细胞功能并直接影I晌JAIT的炎症进程。所以 研究特定微环境作用下的CD4+T细胞胞内蛋白调控机制具有重要意义。 靶mRNA的3’．UTR端形成特异性结合进而控制堆囚的表达，为机体后转录层次上 控制基因表达的重要分子。近来研究发现，microRNAs不仪参与细胞的多种功能， 如发育、成熟、分化及凋亡，特别是对重要的免疫细胞——_T细胞具有贯穿始终的 调控作用。学者们已经在多种自身免疫疾病中发现了异常表达的miRNA，但是AIT 在高碘诱发甲状腺炎的小鼠脾脏的CD4+T细胞及甲状腺组织中的表达量变化。探 讨miR．155，miR．146，miR．326在AIT发生、发展中的免疫调节作用。 方法 组(给予无菌双蒸水)和2个高碘饮水组(给予含0．05％碘化钠溶液，相当于小 饮水组各lO只。于实验开始后第12、20周麻醉分别处死1个高碘饮水组小鼠和 相应对照组小鼠。 12周组留取各组NOD．H一2h4小鼠甲状腺，HE染色观察淋巴细胞浸润情况并 进行甲状腺炎症程度评分；常规制备各小鼠脾脏单个核细胞悬液，使用MACS磁 珠分选CD4+T细胞；免疫荧光染色流式细胞仪分析分选比率；试剂盒提取CD4+T 细胞small 相对表达水平。 20周组留取各组NOD．H．2h4小鼠单侧甲状腺，HE染色观察淋巴细胞浸润情 况并进行甲状腺炎症程度评分；另一侧甲状腺，提取甲状腺组织smallRNA，实 应用SPSS17．0软件处理和分析数据。两组间miRNA平均水平的比较采用两 独立样本t检验。检验水准a均取O．05。 结 果 NOD．H．2h4小鼠饮高碘水12周及20周后甲状腺组织有不同程度的淋巴细胞 浸润，甲状腺炎的发生率、甲状腺炎症程度组织学评分水平均明显高于饮用无菌 2 表达量较对照组均明显升高(PO．05，PO．001)。 二口结论J．己 及发展。本研究对于深入理解CD4+T细胞的胞内调控CtN和AIT的炎症过程提供 了新的线索。但是这种功能异常的具体通路，并且最终对AIT的炎症过程有何影 响，还需要深入探讨。 关键词 3 ● ● 英文结构