非小细胞肺癌组织中STAT3、CyclinD1和Ki67蛋白的表达水平和相关性研究.pdfVIP

目 录 非小细胞肺癌组织中STAT3、CyclinD1 及Ki67 蛋白的表达水 1 平及相关性研究………………………………………………1 1.1 中文摘要………………………………………………………1 1.2 英文摘要………………………………………………………5 1.3 前言……………………………………………………………7 1.4 材料与方法……………………………………………………10 1.5 结果……………………………………………………………14 1.6 讨论……………………………………………………………24 1.7 结论……………………………………………………………28 1.8 参考文献………………………………………………………29 1.9 英汉对照表……………………………………………………31 2 致谢……………………………………………………………32 3 信号传导及转录激活因子 3 与肺癌的研究进展 （综述）…… 33 非小细胞肺癌组织中STAT3、CyclinD1 及Ki67 蛋白的表达水平及 相关性研究 摘 要 目的：检测非小细胞肺癌 （Non-Small Cell Lung Cancer, NSCLC ）组织 与正常肺组织中信号转导与转录激活因子3 （Signal transducer and activator of transcription 3, STAT3 ）、细胞周期素D1 （cyclinD1 ）和Ki67 蛋白的表 达情况，探讨三者之间是否存在相关性同时分析STAT3、cyclinD1 和Ki67 蛋白是否与非小细胞肺癌的各个临床因素有关。方法：通过免疫组织化学 Envision 二步法检测正常肺组织（20 例）及NSCLC 组织（30 例）中STAT3 蛋白、cyclinD1 蛋白及Ki67 蛋白的表达情况。所有NSCLC 组织均来源于 胸外科手术切除获得，患者未作任何放、化疗或其他抗癌治疗。所有标本 均经10%福尔马林固定，常规脱水，石蜡包埋，切片机连续切片，清水冲 洗，予以缓冲液（PBS ）浸泡，将标本放入高压锅进行高温修复抗原，再 予以 3 ％过氧化氢灭活内源性过氧化物酶，滴加正常山羊血清封闭液。向标本组 织中滴加抗体：一抗分别为 STAT3 兔抗人多克隆抗体，鼠抗人 cyclinD1 单克隆抗体，鼠抗人 Ki67 单克隆抗体，孵育，缓冲液（PBS ）冲洗，滴 加Envision 二抗孵育，缓冲液（PBS ）冲洗，二氨基联苯氨 （DAB ）显色， 苏木素复染，透明，封片观察。STAT3 蛋白、cyclinD1 蛋白及Ki67 蛋白 均以细胞质或细胞核内出现棕黄色或棕褐色颗粒为阳性细胞。实验结果显 示，在 STAT3 蛋白表达阳性的非小细胞肺癌细胞中，STAT3 蛋白主要位 于细胞质；在cyclinD1 蛋白表达阳性的非小细胞肺癌细胞中，cyclinD1 蛋 白主要表达在细胞核，少部分表达于细胞质；在Ki67 蛋白表达阳性的非小 细胞肺癌细胞中，Ki67 蛋白的表达主要位于细胞核。根据细胞质或细胞核 内出现棕黄色颗粒或棕褐色团块细胞占所有细胞的比例及细胞颜色的深浅 将切片按程度划分－、+ 、++ 、+++ 四级。完全不表达或阳性表达少于5 ％ 者定为阴性 （—）；阳性表达细胞在5 ％－25 ％之间者定为弱阳性（+ ）， 阳性表达细胞在26 ％－50 ％之间者为阳性（++ ），阳性表达细胞大于50 ％ 者为强阳性（+++ ）。结果：⑴ STAT3 蛋白、cyclinD1 蛋白、Ki67 蛋白在 非小细胞肺癌标本组织中的表达都显著高于在正常肺组织中的表达，统计 分析结果显示，差异均有显著统计学意义 （P0.01 ）；⑵ STAT3 蛋白、 cyclinD1 蛋白、Ki67 蛋白的表达水平均与患者的年龄、肿瘤大小、组织分 化程度、淋巴结转移及TNM 分期无明显关系 （P ＞0.05 ）；⑶ STAT3 蛋 白和 cyclinD1 蛋白在非小细胞肺癌标本组织中的表达水平无明显关系 （P=0.787 ，P ＞0.05 ）；⑷STAT3 和K