减毒活菌卡介苗(BCG)早期接种对哮喘小鼠气道炎症保护作用和其免疫机制研究.pdfVIP

浙江人学博{：学位论义 中义摘要 减毒活菌卡介苗(BCG)早期接种对哮喘小鼠气道炎症的保 护作用及其免疫机制研究 中文摘要 支气管哮喘(Asthma)是一种以肥大细胞、嗜酸性粒细胞和T淋巴细胞气遒 浸润，以黏液高分泌、气道高反应性、气道重构为特征的慢性变态反应性疾病。 既往“卫生学说”很好地解释了近来哮喘的高发病率。减毒活菌卡介苗 bovisbacillus (Mycobacterium 动物和人体研究显示，BCG接种和／或感染可明显抑制哮喘的病理生理改变。我们 前期研究发现，新生鼠BCG接种可以明显抑制成年后OVA致敏激发诱导的过敏 性气道炎症和气道高反应性(airway 舞，为哮喘的预防提供了曙光。 一直来困扰的问题在于：BCG防治哮喘的具体机制是什么?过去的研究均以 “卫生学说”来解释，认为BCG接种和／或感染刺激了机体Thl细胞因子的产生，降 低了Th2细胞因子的释放，从而达到抑制哮喘的作用。随着新型Th细胞(Thl7) 以及调节性T细胞(Treg)的发现以及功能的不断研究，这些细胞是否会在BCG 特定情形下也能抑制Thl免疫反应，考虑到Thl7与Thl细胞之间的相互调节作用， Thl7可能在BCG防治哮喘中起到一定的作用。虽然早期的研究认为微卡 (Mycobacteriumvaccae)能够通过诱导调节性T细胞抑制哮喘炎症，但是其调节性T 细胞并不是目前比较公认的Foxp3+T调节细胞；最近研究发现BCG以及延迟冷 前没有关于BCG通过Treg细胞达到抑制哮喘作用的可信服研究。基于此，Thl7和 Treg细胞是否参与BCG接种防治哮喘还有待于进一步证实。 关于BCG防治哮喘比较认可的观点仍然为：BCG促进了机体Thl免疫反应， 浙江人学博上学位论义 中义摘要 从而达到了抑制哮喘的病理生理作用。既往的研究几乎局限于脾脏以及BALF的 Thl免疫反应，近来有研究表明BCG或者BCG衍生物接种后，局部肺组织内增高的 Thl细胞以及Thl免疫反应在哮喘的防治中起到重要的作用。BCG接种促进了机体 胞向肺组织的募集，或者肺内静息的记忆性CD4和／或CD8+T细胞在结核杆菌／OVA 攻击后引起了二次免疫。目前尚没有“关于BCG接种后引起机体免疫系统(免疫功能) 的变化以及这种变化在抑制哮喘的病理生理中的作用”的系统研究。一个非常重要 但没有阐明的问题在于：BCG接种尾根部，其引流淋巴结为腹股沟淋巴结，而哮 喘气道炎症发生的部位为肺脏，BCG接种诱发的Thl免疫应答如何在以肺脏n也为 主导的过敏性气道炎症中起到保护作用呢?也就是说BCG皮下接种后，OVA致敏 皮下接种后，活的细菌主要集中在引流淋巴结，少量迁移到脾脏，而肺组织基本 检测不到BCG活菌的菌落数，由此肺组织内不可能产生效应性T细胞。而记忆性T 细胞产生的一个必要条件是机体抗原的清除，而BCG接种后抗原在很长时间内不 会清除，由此机体产生记忆性T细胞也是很困难的。由于效应性T细胞在机体静息 状态下可以由淋巴组织向非淋巴组织迁移，一旦机体发生炎症反应，效应性细胞 能够趋化募集到相应的炎症组织，发挥其生物学作用。为此，我们假设“BCG接 种后，哮喘小鼠肺脏增高的Thl细胞和Thl免疫应答可能来自BCG接种部位的引流 淋巴结”。 由此，本研究主要分两部分：(1)首先讨论在静息状态以及OVA攻击后，BCG 转移来自于BCG接种部位的引流淋巴结而不是脾脏；(2)接下来我们系统分析了引 流淋巴结I勾CD4+T细胞的表型以及功能变化，通过过继试验和体内示踪证实引流 淋巴结内的CD4+T细胞参与了肺组织的迁移以及抑制哮喘气道炎症的作用。本研 究为BCG接种防治哮喘提供更有说服力的试验依据，同时为哮喘的免疫治疗提供 了新的方向。 II! 浙江大学博1j学位论文 中文摘要 第一部分：BCG早期皮下接种抑制哮喘小鼠气道炎症以及气道高反应 性，该作用与表达IFN—y的CD4+T细胞向肺组