05第六章__离子交换层析pptConvertor.docVIP

第五章 离子交换层析 离子交换层析 在以离子交换剂为固定相，液体为流动相的系统中进行。 第一节 基本原理 离子交换剂： 由基质、电荷基团(或功能基团)和反离子构成(见图5-1)。 在水中呈不溶解状态，能释放出反离子。 在此同时，它将与溶液中的其他离子或离子化合物相互结合，结合后本身的理化性质仍保持不变。 纤维素 O CH2 COO— Na+ 基质 电荷基团 反离子 图5-1 羧甲基纤维素离子交换剂组成示意图 离子交换剂与水溶液中离子或离子化合物的反应： 主要以离子交换方式进行，或者,离子交换剂上电荷基团对溶液中离子或离子化合物的吸附作用进行。 这些过程都是可逆的。 假设以RA代表阳离子交换剂，它在溶液中解离出来的阳子A+与溶液中的阳离子B+能发生可逆的交换反应，反应式如下： RA+B+=RB+A+ 离子交换剂对溶液中各种离子具有不同的结合力， 这种结合力的大小是由离子交换剂的选择性决定的。 离子交换的选择性可用其反应的平衡常数KBA表示: KBA=[RB][ A+]/[RA][ B+] 如果在反应溶液中[A+]的摩尔浓度与[B+]的相等时，则KBA=[RB]/[RA]。 若KBA值1，即[RB][RA]，这表示离子交换剂对B+的结合力要比对A+的大； 若KBA值=1，即[RB]=[RA]，这表示其对B+和A+的结合力相同; 若KBA值1，[RB][RA]，表示其对B+的结合力要比对A+的小。 KBA值是反映离子交换剂对不同离子的结合力或选择性的参数，所以称KBA值为离子交换剂对A+和B+的选择系数。 从Bio-Rad公司1986年提供的资料(见表5-1)看出： 强酸性(阳性)离子换剂对H+的结合力比对Na+的小； 弱酸性离子交换剂对H+的结合力远比对Na+的大； 强碱性(阴性)离子交换剂对OH- 的结合力比对C1-的小得多； 弱碱性离子交换剂对OH- 的结合力比对Cl- 的大。 因此，在应用离子交换剂时，采用何种反离子进行电荷平衡是决定吸附容量的重要因子之一。 离子交换剂与各种水合离子(离子在水溶液中发生水化作用形成的)的结合力是： 与离子的电荷量成正比，而与水合离子半径的平方成反比。 所以，离子价数越高，结合力越大。 在离子间电荷相同时，则离子的原子序数越高，水合离子半径越小，结合力亦越大。 因此在稀溶液中离子发生水化时，各种阴离子和阳离子结合力大小的排列次序如下： 一价离子：Li+Na+K+Rb+Cs+ (对阳离子交换剂) 二价离子：Mg2+Ca2+Sr2+Ba2+ (对阳离子交换剂) 一价阴离子：F-C1-Br-I- (对阴离子交换剂) 不同价阳离子：Na+Ca2+Al3+Ti4+ (对阳离子交换剂) 对于呈两性离子的物质(如蛋白质、酶类、多肽和核苷酸等)与离子交换剂的结合力，主要取决于： 它们的物理化学性质和在特定pH条件下呈现的离子状态。 当pH低于等电点(pI)时，它们能被阳离子交换剂吸附； 反之，pH高于pI时，它们能被阴离子交换剂吸附。 若在相同的pH条件下，且pIpH时，pI越高，碱性越强就越容易被阳离子交换剂吸附。 图5-2是反映样品液在阳离子交换层析柱上分离情况的示意图。 根据图示理解用离子交换剂分离不同物质的基本原理。 第二节 离子交换剂的分类及性质 实用的离子交换剂应满足下列要求： ①有高度的不溶性，即在各种溶剂中进行交换时，交换剂不发生溶解； ②有疏松的多孔结构或巨大的表面积，使交换离子能在交换剂中进行自由扩散和交换； ③有较多的交换基团； ④有稳定的物理化学性质，在使用过程中，交换剂不能因物理或化学因子的变化而发生分解和变形等现象。 一、分类 根据离子交换剂中基质的组成和性质，可将其分成两大类： 疏水性离子交换剂 亲水性离子交换剂 1．疏水性离子交换剂 疏水性离子交换剂中的基质是一种人工合成的、与水结合力较小的树脂物质。 常用的一类树脂是由苯乙烯和二乙烯苯合成的聚合物，其中二乙烯苯是交联剂，它能把聚乙烯苯直链化合物以相互交叉的方式连接成类似海绵状的结构。 在此结构中以共价键方式引入不同的电荷基团。 这种离子交换树脂以电荷基团的性质分类有： 阳离子交换树脂(分别包括强、中、弱三种电荷基团) 阴离子交换树脂(分别包括强、中、弱三种电荷基团) 螯合离子交换树脂(对金属离子有较强的选择性) (1)阳离子交换剂 阳离子交换剂的电荷基团带负电，反离子带正电。 因此，这种交换剂可以与溶液中的正电荷化合物或阳离子进行交换反应。 根据电荷基