HPLC法测定双黄连注射液中黄芩苷及连翘苷含量.docVIP

HPLC法测定双黄连注射液中黄芩苷及连翘苷含量【摘要】 目的：建立测定双黄连注射液中黄芩苷和连翘苷含量的高效液相色谱法。方法 采用高效液相色谱法，色谱柱为Waters Symmery C18 ( 250mm×4.6mm,5μm ),流动相为乙腈―水（25?75），流速为1.0ml/min，检测波长为227nm，柱温为30℃。结果：黄芩苷、连翘苷的线性范围分别为1.63～8.51；0.43～2.14，重复性试验的RSD为 0.91 %、1.59% （n=6） ，平均回收率为 92.56%、95.75%，RSD分别为0.82%、2.39%（n=6）。结论：本方法简便易行，结果准确，可用于双黄连注射液的质量控制。 【关键词】 高效液相色谱法；双黄连注射液；黄芩苷；连翘苷；含量测定 determination of baicalin and forsythin content in Shuanghuanglian injection by HPLC Li Xiaoyun，Li Xiaoliang (Hezhou People’s Hospital, Guangxi Hezhou, 542800) 【Abstract】 Objective To set up a HPLC method for the determination of baicalin and forsythin content in Shuanghuanglian injection. Methods HPLC column was Waters Symmery C18(250mm×4.6mm, 5μm), the mobile phase was acetonitrile － water(25∶75)，the detection wavelength was 280 nm and the flow rate was 1.0 ml *min-1, the column temperature was 30℃．Results The linear range of Baicalin and Forsythin were 1.63～8.51； 0.43～2.14，the RSD of the repeatability test were 0.91%,1.59% (n = 6)，The average recovery rate of forsythin were 92.56%、95.75%，the RSD were 0.82%、2.39%(n= 6)．Conclusion The method is simple，convenient，accurate and reliable，which can be used for quality control of Shuanghuanglian injection． 【Key words】 HPLC; Shuanghuanglian injection; baicalin; forsythin; determination 双黄连注射液是由金银花、黄芩、连翘三味药材经科学方法提取的无菌注射液，是临床常用的中药注射剂，主要功效为清热解毒，具有抗菌抗病毒作用。目前，双黄连注射液收载于《卫生部中药成方制剂》第七册，原标准中只收载了黄芩苷的含量测定方法，没有金银花和连翘的含量测定方法，因此本文通过系统摸索，获得了HPLC同时测定双黄连注射液中黄芩苷、连翘苷两个指标性成分的色谱条件，相应的方法学考察结果表明，本研究所建方法简单，结果准确，可用于双黄连注射液的质量控制，现报道如下。 1 仪器与试药 1200型高效液相色谱仪（美国 Agilent 公司）；CP225D型电子天平(德国赛多利斯公司)；AW-120型电子天平（西班牙 COBOS 公司）。 黄芩苷、连翘苷对照品（中国药品生物制品检定所；批号分别为110715-200514、110821-200711）；双黄连注射液（黑龙江多多药业有限责任公司，批号080310212 、070920312 ）乙腈为色谱纯，其它试剂为分析纯，水为超纯水。 2 方法与结果 2.1 色谱条件 色谱柱：Waters Symmery C18 ( 250mm×4.6mm,5μm )；流动相：乙腈―水（25?75）；检测波长：227nm；流速：1ml/min；柱温：30℃；进样量：供试品30?l、连翘苷5μl、黄芩苷10μl。 2.2 溶液的制备 2.2.1 对照品溶液 精密称取经五氧化二磷减压干燥12h以上的黄芩苷、连翘苷对照品适量，分别加入50%甲醇制成每1ml含连翘苷42.82?g、黄芩苷 16.30 ?g