米诺环素对糖尿病大鼠视网膜神经细胞凋亡和bcl-2、bax表达的影响.pdfVIP

米诺环素对糖尿病大鼠视网膜神经细胞凋亡 及 bcl-2、bax 表达的影响 摘要 目的： 观察早期糖尿病大鼠视网膜组织形态的变化与神经细胞凋亡及 bcl-2 、bax 的表 达，探索米诺环素（minocycline ，MNC ）对糖尿病大鼠视网膜神经细胞凋亡及Bcl -2 、 Bax 表达的影响，研究米诺环素对糖尿病视网膜神经保护机制，对米诺环素在糖尿病视 网膜疾病中抑制神经细胞凋亡提供新的理论依据。 方法：选择健康成年雄性 SD 大鼠 60 只,随机分成正常对照组、糖尿病对照组和米诺环 素治疗组,每组 20 只。腹腔内注射链脲佐菌素(STZ) 诱发大鼠糖尿病。米诺环素治疗 组给予米诺环素腹腔注射（45mg/kg ）,共注射 10d,模型组和对照组腹腔注射等体积生 理盐水, 于给药后 4 周和 8 周后的 3 组动物，分别取每组各 10 只动物处死，取其眼球， 制备视网膜石蜡切片, 采用末端脱氧核糖核酸介导生物素化脱氧尿嘧啶缺口末端标记 （Terminal Deoxynucleotidyl Transferase Biotin-dUTP Nick End Labeling，TUNEL) 法进 行凋亡细胞原位标记,行视网膜神经细胞凋亡计数,行免疫组化染色, 并对染色结果行 计算机图像分析，测每组 Bcl-2 、Bax 的表达，对所有数据进行统计学分析。实验结果 拟用均数和标准差（x±s ）表示， P0.05 为差异有统计学意义。同时制备视网膜超微病 理切片，在透射电镜下,行超微结构观察。 结果：同一观察时间点，Bax 在正常组大鼠视网膜神经细胞见弱表达；在糖尿病组神经 细胞有强表达,表现为胞质中棕黄色颗粒增加,颜色加重；Bax 在米诺环素治疗组的表达 较糖尿病组降低( P 0. 01) , 表现为颗粒减少、颜色变浅。Bcl-2 在正常组大鼠视网膜 神经细胞见弱表达,在糖尿病组有较强表达；Bcl-2 在米诺环素治疗组的表达较糖尿病组 增强( P 0. 01) ；在不同观察时间，糖尿病组与米诺环素组大鼠视网膜神经细胞内Bcl-2 表达差异无显著性 ( P 0. 05) ，Bax表达8周较4周增多，差异有显著性 ( P 0. 01) 。 同一观察时间，与正常对照组比较,糖尿病对照组视网膜凋亡细胞增多(P 0.01) ,在米 诺环素组,大鼠视网膜凋亡细胞比糖尿病组减少,差异有统计学意义( P 0.05) , 电镜下 正常组:视网膜神经细胞胞膜完整,染色质分布均匀,线粒体及粗面内质网含量丰富,嵴 清楚。糖尿病组:神经细胞胞膜皱缩,胞质浓缩,核固缩,染色质边集现象明显,线粒体肿 胀,嵴模糊不清或空泡变。米诺环素治疗组:神经细胞无明显改变,胞膜完整,核周间隙正 常,内质网排列较整齐,线粒体轻度肿胀,嵴模糊不清,染色质疏松。 结论：米诺环素能有效降低有效降低糖尿病大鼠视网膜神经细胞的凋亡，可降低视网膜 神经细胞内 Bax 的表达，有效提高神经细胞内Bcl-2 的表达，这是米诺环素抑制糖尿病 视网膜神经细胞凋亡的途径之一。 关键词：米诺环素；糖尿病；视网膜；bcl-2 ；bax 论文类型：B （应用研究） I The effect of the Minocycline on expression of apoptosis and bcl-2, bax in retinal nerve cells of rat with diabetes. Abstract Objective: To study the histopathological changes of the retina and to measure the expression of apoptosis in the retina of the diabetic rats . The study is to preliminary investigate the