神经酰胺在酒精性肝病发病机制中作用的实验探究.pdfVIP

目 录 中文摘要…………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………3 英文缩写……………………………………………………………………．：6 研究论文神经酰胺在酒精性肝病发病机制中作用的实验研究 前言………………………………………………………………．．7日IJ吾………………………………………………………………．．’7 材料与方法……………………………………………………………．7 结果……………………………………………………………………．14 附图……………．…………．．：……………………………………………．15 附表………………………………………………………………………………．21 讨论……………………………………………………………………23 结论……………………………………………………………………．27 参考文献………………………………………………………………27 1 综述神经酰胺在酒精性肝病发病机制中的作用…………………………3 致谢…………………………………………………………………………．42 个人简历……………………………………………………………………．．43 万方数据 中文摘要 神经酰胺在酒精性肝病发病机制中作用的实验研究 摘 要 liver 目的：酒精性肝病(alcoholic 入或短期过量饮酒所致的肝脏疾病，其初期通常表现为脂肪肝，严重者可 进展至脂肪性肝炎、肝纤维化甚至肝硬化。酒精引起肝功能损伤的具体机 制尚不十分明确，目前有研究发现神经酰胺(ceramide)参与到其发病过 程中。神经酰胺属于鞘磷脂类，参与构成生物膜，并为鞘磷脂信号途径中 重要的第二信使，能够激活多种蛋白激酶和蛋白磷酸酶如蛋白磷酸酶2A 2A，PP2A)，调节凋亡、增殖等信号过程。乙醇激 (proteinphosphatase 活酸性鞘磷脂酶(acid activated monophosphateprotein 化失活，进而影响到下游一系列脂代谢调节基因，导致肝细胞内脂肪堆积。 本研究采用酒精灌胃方式建立大鼠ALD模型，通过分子生物学方法探讨神 经酰胺、酸性鞘磷脂酶及蛋白磷酸酶2A在酒精性肝病发病机制中的作用。 周之后，随机分配10只作为正常对照组，其余大鼠作为模型组每日灌入酒 精，并分别在第4周、8周、12周和16周末处死模型组大鼠10只、9只、8 只和8只。取出大鼠肝脏后，用4％中性甲醛溶液固定一部分肝组织，经石 理改变，其余组织．80。C保存待用。 采用实时荧光定量聚合酶联反应(Real Polymerase Time．quantitative Chain 色谱．质谱联用法(}玎)LC．MS)检测肝组织神经酰胺含量。 结果： 1肝脏组织病理学改变：4周大鼠肝细胞可见脂肪变性，至8周、12 周，脂肪变加重，炎症增多并伴随纤维组织增生，至16周，肝细胞呈弥 漫小泡性脂变，可见肝窦周围纤维化、汇管区的纤维组织增生，并观察到 万方数据 中文摘要 已形成的纤维间隔。 2免疫组化技术检测各指标蛋白表达水平：正常组大鼠肝组织中 ASMase、PP2A阳性表达较少，酒精模型组阳性表达量呈增加趋势。 3 ASMase、PP2A mRNA表达量较少，酒精模型组mRNA表达量逐渐增加， 与正常对照组