类风湿性关节炎中PCNP及TIPE2的表达及意义.pdfVIP

摘要 背景 Arthritis，RA)是一种累及周围关节为主的多系 类风湿性关节炎(Rheumatoid 统炎症性自身免疫疾病，其特征的表现为对称性、多个周围关节的慢性炎症病变， 可引起关节肿痛，晚期出现关节的强直、畸形和功能严重受损，预后往往较差。 其主要病理特征是滑膜增生及多种炎症细胞的浸润，RA的发病率在我国约为 O．4％，全球为0．5％～1．0％I”l。目前确切的病因尚不清楚，其致炎过程极为复杂， 是由多种细胞因子、黏附分子和趋化因子等参与的复杂的免疫过程，是多基因协 同作用的结果。 nuclear PEST-containingprotein(PCNP)是一种核蛋白，主要存在细胞核内， 这种新型的指环状蛋白是一种具有泛素化能力的蛋白连接酶，参与到蛋白降解的 泛素化途径中。目前研究表明其与细胞周期调控有关。 necrosisfactor-ainduced 8like TIPE2(tumor protein2)是2002年新发现的一个 维持免疫系统自稳平衡必需的基因之一，属于TIPE家族成员之一，编码的蛋白 effect 中含有6个a螺旋和类似死亡效应结构域(deathdomain,DED)的结构域，可 8等含有DED结构域的蛋白结合，发挥抑制凋亡的作用121。最近的 以和如Caspase 研究证实，TIPE2在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中表达量明显升高， 在糖尿病肾病中表达量也显著升高。这提示TIPE2或许在自身免疫性疾病的发生 发展中也具有重要作用。 调控分子PCNP、TIPE2与类风湿性关节炎的关系目前少有报道，我们的实 验将研究二者在类风湿性关节炎发病中的作用，并来探讨二者的相关性。 目的 脾脏及类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞中的表达及其意义。为类风 湿关节炎的发病机制提供依据，并为RA诊断和治疗提供线索。 方法 1．用完全弗氏佐剂和牛Il型胶原注射DBA小鼠，建立类风湿关节炎小 鼠模型； 2．采集临床类风湿关节炎患者外周血，分离单个核细胞，提取细胞总 RNA和蛋白质； 3．利用PCR技术检测类风湿关节炎小鼠模型和对照组脾脏，以及RA 病人和正常人的外周血单个核细胞PCNP、TIPE2基因表达差异； 4．利用Western blotting技术检测类风湿关节炎小鼠模型和对照组脾 脏，以及RA病人和正常人的外周血单个核细胞PCNP、TIPE2蛋白表达差 异； 5．用实时荧光定量PCR检测类风湿关节患者和正常对照组的外周血单 个核细胞PCNP、TIPE2基因表达差异。 结果 1．成功诱导出DBA小鼠类风湿关节炎模型，诱导成功率为100％。 者外周血单个核细胞的表达高于对照组； 3．Western 中和RA患者外周血单个核细胞的表达高于对照组； 血中的基因表达高于对照组，病人活动期较稳定期表达量更高。 结论 1．PCNP、TIPE2在类风湿关节炎的小鼠模型脾脏和类风湿关节炎患者 外周血高表达； 2．PCNP、TIPE2的表达量与类风湿性关节炎的严重程度相关。有可能 成为以后类风湿性关节炎临床诊断、治疗和判断预后的重要指标。 关键词：类风湿关节炎；PQ岬：TIPE2 Abstract Rheumatoid a Background Arthritis(RA)ismultisystem inflammatory autoimmunedisease which the whichis around,and