胶质瘤干细胞的3D培养和其核酸适体筛选的探索.pdfVIP

胶质瘤干细胞的3D培养和其核酸适体筛选的探索.pdf

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胶质瘤干细胞的3D培养和其核酸适体筛选的探索

福建医科大学硕士论文 - 1 - 福建医科大学硕士论文 目 录 英文缩略表 - 4 - 摘 要 - 5 - Abstract - 6 - 前 言 - 8 - 第一部分 胶质瘤干细胞的 3D 培养 „„„„„„„„„„-9- 1.1 引 言 …………………………………………………………-9- 1.2 实验材料: ……- 10 - 1.3 实验方法: - 11 - 1.3.1 细胞培养 - 11 - 1.3.3 μCGA 的制作 - 12 - 1.3.4 单细胞增殖能力异质性分析- 13 - 1.3.5 胶质瘤干细胞的 CD133 及 Nestin 鉴定- 13 - 1.4 结果 - 14 - 1.4.1 μCGA 单细胞捕获- 14 - 1.4.2 μCGA 单细胞长期培养可行性实验- 15 - 1.4.3 三维培养条件下的单细胞增殖能力异质性分析 - 15 - 1.4.4 胶质瘤干细胞的鉴定- 19 - 1.5 讨论 - 20 - 1.6 小结 - 22 - - 2 - 福建医科大学硕士论文 第二部分、胶质瘤干细胞核酸适体筛选及应用 - 23 - 2.1 引言 - 23 - 2.2 实验材料 - 25 - 2.2.1 试剂与仪器 - 25 - 2.2.2 DNA 文库合成 - 27 - 2.3 实验方法 - 28 - 2.3.1 细胞培养- 28 - 2.3.2 胶质瘤干细胞的核酸适体筛选- 28 - 2.3.3 检测库的富集情况- 30 - 2.4 结果 - 31 - 2.4.1 细胞培养 - 31 - 2.4.2 琼脂糖电泳凝胶图- 32 - 2.4.3 流式细胞仪监测核酸适体的筛选进程- 32 - 2.4.4 富集库的亲和力测定- 33 - 2.5 讨论 - 35 - 2.6 小结 - 38 - 全文结论 - 38 - 参考文献 -399- 综 述 -544- 致 谢 ………………………………………………………………………………………….-58- - 3 - 福建医科大学硕士论文 英文缩略表 SELEX Systematic Evolution of Ligands 配体的指数富集系统进化 GBM Glioblastoma multiforme Collection 多形性胶质母细胞瘤 TN-C tenascin-C 肌腱蛋白-C ATCC American Type Culture Collection 美国模式培养物保藏库 PCR Polymerase Chain Reaction 聚合酶链反应 BSA Albumin from Bovine Serum 牛血清白蛋白 Kd dissociation constant 解离常数 μ-TAS miniaturized total analysis system 微全分析系统 μCGA Mi

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