体外大鼠椎间器官模型的制备.pdfVIP

山西医科大掌硕士学位论文 体外大鼠椎间盘器官模型的制备 摘要 目的：椎间盘退变是慢性下腰痛的重要原因，如何在体外对其发病机制进行研究 是目前研究的热点。我们整体培养包括上下软骨终板、纤维环及髓核组织的大鼠 椎间盘器官，观察髓核组织的变化以及髓核细胞外基质主要成分的mRNA表达，探 索一种椎问盘器官整体培养的实用技术并对其培养结果进行评价； 方法：取sD大鼠90只，完整取出腰段椎间盘器官共400个，随扭佥盘4组，置入12 孑L培养板内，配制高渗培养液渗透压为410mOsm／kg，对椎间盘器官进行整体培养， 在0，3，7，14天时间点取材并做为分组标准，用NBT和DAPI双重染色来观察髓核 细胞成活率、HE、番红O染色观察组织完整性及II型胶原免疫组化染色和I、II型 胶原蛋白，核心蛋白聚糖，聚集蛋白聚糖mRNA表达情况观察基质变化情况。然后 各组间再进行两两比较观察随着培养时间的延长椎间盘组织的变化情况； 结果：体外培养两周的椎间盘大体组织形态、细胞存活率及髓核细胞外基质组织 成分与新鲜离体椎间盘无统计学差异。由此可见：通过我们的培养方法可以在体 外成功的培养椎间盘完整器官，并且可以保证两周内无明显变化； 结论：我们参考Haschtmann实验方法建立鼠椎间盘整体培养模型的方法，利用高 渗培养液可对椎间盘器官进行整体培养，为椎间盘的生理与病理的研究提供一种 理想的模型。 关键词： 椎间盘 器官培养 髓核组织 山西医科大学硕士学位论文 0fthenucleus whenratdisc whole The asa change pulpOsus iscultured organsystem Abstract reasonforchroIliclowback t0 objectiVe：DiscdegeIlerationis锄impoftaIlt pain，how its inVi仃ois ahotresearch．T．06nda memodof studypathogenesiscumelltly practical discs the ofthenucleus t11e Cul嘶ngo玛a11sySt锄byobservingch锄ges pulposus锄d the main of nucleusex打acellularmatrixmRNA anertllew．hole components eXpression intervene：bral alldallulus 6bros吣， discs，includingcanilagee119-plate肌cleus，pulposus were and the cultiVated resultsoftheirculture； eValuating Methods：400interv瞰ebraldiscsweretal(ellout 90SDra．ts锄d