四种染色体检测技术在产前诊断临床应用探究.pdfVIP

四种染色体检测技术在产前诊断 临床应用研究 博士研究生：吴菁 指导老师：钟梅教授 摘要 染色体异常是与遗传相关最常见的出生缺陷。由于染色体是基因的载体， 因而染色体发生异常，将会导致基因增加或缺失，从而出现智力低下、多种器 官、组织畸形，表现出多种症状和体征，它是造成出生缺陷的主要原因之一。 影响严重的是迄今为止，尚无有效治疗方法。唯一有效措施是在孕期及早发现， 及早处理，避免此类患者出生。 染色体异常分为数目异常和结构异常。胎儿常见的染色体异常发生在2l， 18， 13号常染色体和性染色体X、Y的非整倍体异常，该类异常占活产儿染 色体异常的95％，临床主要表现为2l-三体综合征(DownSyndrome，DS)，18． 三体综合征(EdwardSyndrome)，13-三体综合征(PatauSyndrome)，45，X (Turner Syndrome)，47，XXY(KlinefelterSyndrome)等。在所有染色体异常 中，DS是最常见染色体异常，没有产前诊断和治疗性流产干预的情况下，其 出生率约为1．5％0。众所周知，DS是一种中度～重度智力低下，机体功能缺陷， 器官多发畸形等的综合症候群，先天性心脏病患儿中有15～50％是DS。至今尚 无有效的治疗方法，DS的医疗看护、康复、特殊教育与培训是个漫长的过程， 需要有大量的投入，而且绝大多数病人丧失工作能力，只能被动地依靠社会、 家庭的抚养。它给家庭和社会带来巨大痛苦和负担。 由于染色体异常无法治疗，因而孕期通过产前诊断，阻止异常的胎儿出生 摘要 是降低染色体异常出生缺陷率的有效措施。产前诊断如果发生错误会导致患儿 出生或正常胎儿流产，造成严重后果。所以应用于产前诊断的检测技术要求技 术成熟、诊断准确率高，最大程度避免误诊和漏诊。20世纪70年代，首例羊 水细胞培养、核型分析的成功，实现了在妊娠中期对染色体异常胎儿做出明确 诊断，标志着产前诊断技术的建立。几十年来，传统的细胞遗传学技术曾是检 测染色体异常的唯一方法。近十余年，随着各种分子生物学技术的飞速发展， 很多新的染色体异常诊断技术开始发展和成熟。目前，用于产前诊断染色体异 常的检测技术主要有3类技术，一是细胞遗传学技术即核型分析；二是快速染 detection，RAD)技术，主要有荧光原位杂交技 色体异常检测(rapidaneuploidy insitu 术(fluorescence fluorescence chain (quantitative polymerasereaction，OF．PCR)；三是分子核型 技术即微阵列比较基因组杂交技术(array．based comparativegenomic oraCGH)。由于任何一种检测技术都不可能完全诊断 hybridization，array．CGH 染色体异常，面对众多的检测技术，如何兼顾效益和检出率选择合适的检测技 术用于产前诊断，关键是充分研究和了解各种染色体检测技术的局限性。 核型分析技术是非常成熟的技术，一直以来都是诊断染色体异常的金标准。 它需要通过细胞培养后，再进行核型分析。产前诊断的绒毛、羊水细胞有两种 培养方法：原位法和培养瓶两种方法。原位培养方法培养时间短，成功率高， 对细胞培养中的嵌合问题容易判断。培养瓶法现在国际上已摒弃不用，绝大多 数实验室都使用原位细胞培养方法。大多数使用平皿盖玻片的原位细胞培养方 法，操作繁琐，对技术要求高，因此在国内尚未推广应用。很多国内实验室还 是使用培养瓶法进行细胞培养。为解决此问题，需要找到一种操作简单、容易 掌握、培养时间短的原位培养方法，来推广此培养技术在国内的应用，从而保 证产前诊断的准确性。 尽管核型分析是诊断染色体异常的金标准，但由于细胞培养时间长，诊断 周期长，一般需要2、3周，给孕妇及家属带来很大的精神压力。而且在细胞培 II