稀土上转换发光纳米材料用于近红外光激发的光动力治疗联合肿瘤基因治疗的探究.pdfVIP

2 稀土上转换发光纳米材料用于近红外光激发的光动力治疗联合肿瘤基因治疗的研究 中文摘要 稀土上转换发光纳米材料用于近红外光激发的 光动力治疗联合肿瘤基因治疗的研究 中文摘要 第一部分 用于光动力治疗的稀土上转换发光纳米材料的制备及 应用初步探究 目的 探讨稀土上转换发光纳米材料 （UCNP ）经聚乙二醇、聚乙烯亚胺通过层层组 装的方法修饰后并连接上光敏剂二氢卟吩 e6 (Ce6) 形成的多功能复合纳米材料 UCNP-PEG@2×PEI-Ce6 用于近红外光激发的光动力治疗应用的可行性及价值。 方法 1)采用高温热分解法制备出掺杂Gd3+ 的上转换纳米颗粒NaGdF4 (Gd : Yb : Er =78% : 20% : 2%)，首先利用聚乙二醇 (polyethylene glycol, PEG)高分子聚合物修饰纳 米粒子增加其水溶性，再通过层层组装的方式将纳米粒子表面修饰两层聚乙烯亚胺 (polyethylenimine, PEI)层，最后得到带有足够正电荷并且仍然具有良好生物相容性的 UCNP-PEG@2×PEI 复合纳米材料，并对其形貌、电位进行表征研究。2)将光敏剂二 氢卟吩 e6 (Ce6)分子通过疏水作用力装载 UCNP-PEG@2×PEI ，形成 UCNP-PEG@ 2×PEI-Ce6 复合物，计算Ce6 装载效率及释放率，并对复合物荧光性质进行表征，检 测复合物单线态氧的产生。3)将不同浓度梯度的UCNP-PEG@2×PEI-Ce6 进行磁共振 T1 序列的扫描，检测其磁共振成像性质。4)通过体外细胞毒性试验（MTT ）对UCNP- PEG@2×PEI-Ce6 颗粒的体外毒性进行研究。5)将不同浓度梯度的 UCNP-PEG@2× PEI-Ce6 转染人宫颈癌 （HeLa ）细胞4 小时后，近红外光(980nm)照射20 分钟后，测 定细胞存活率。 结果1)透射电子显微镜 （TEM ）显示，荧光上转换纳米颗粒（UCNP ）是水溶性良好 的单分散纳米晶体，平均直径约在 30nm 。经过层层修饰以后，UCNP-PEG@2×PEI I 中文摘要 稀土上转换发光纳米材料用于近红外光激发的光动力治疗联合肿瘤基因治疗的研究 颗粒在水溶液中仍然具有较好的稳定性；修饰第二层聚乙烯亚胺之后的UCNP-PEG@ 2×PEI 纳米颗粒较修饰第一层聚乙烯亚胺（PEI ）之后带有更多的正电荷；2) 当UCNP 与 Ce6 的质量比为 2:1 时，Ce6 装载率可达 10%-11%，再增加装载量会导致 UCNP-PEG@ 2×PEI-Ce6 稳定性的下降。3)上转换发光荧光强度显示修饰两层PEI 之 后的纳米颗粒仍然显示出较高的上转换荧光强度。然而，在UCNP-PEG@2×PEI 装载 光敏剂Ce6 之后，上转换荧光强度明显下降，尤其在与Ce6 吸收峰重叠的660nm 发 射峰处。4)在980nm 激光的照射下，随着时间的延长，UCNP-PEG@2×PEI-Ce6 产生 的单线态氧逐步增加，而游离的Ce6 分子则不能产生单线态氧。5)磁共振T1WI 成像 结果显示在一定的浓度梯度内，随着材料浓度的增加，UCNP-PEG@2×PEI-Ce6 磁共 振信号逐渐增加。6)体外细胞毒性实验结果显示UCNP-PEG@ 2×PEI-Ce6 在较高浓度 时对细胞亦未见明显毒性作用。7)在980nm 激光照射下，UCNP-PEG@ 2×PEI-Ce6 随 着浓度的升高，在细胞水平显示出良好的光动力治疗效果。 结论 修饰了两层PEI 后的稀土上转换发光纳米材料带有较多正电荷，且生物相容性 及上转换荧光强度仍然较高。UCNP-PEG@ 2×PEI 可以通过疏水作用装载光敏剂Ce6 。 细胞增殖实验结果表明，UCNP-PEG@2×PEI-Ce6 复合物没有明显的生物毒性，同时 具