紫杉醇脂质体及依托泊苷对骨肉瘤细胞株作用的分子机制研究.pdfVIP

筑。．。 Iq l I II 11111III]]1111qqlllllllI lIIII 1 、t180584 目 录 中文摘要…………………………………………………………………………“1 英文摘要………………………………………………………一…………………”3 研究论文紫杉醇脂质体与依托泊苷对骨肉瘤细胞株作用的细胞毒 性及其分子机制研究 前言………………………………………………………………………………………·6月U看………………………………”……………………………………………………”6 材料与方法…………………………………………………………………·7 结果………………………………………………………………………………………·13 附图………………………………………………………………………………………·15 附表………………………………………………………………………………………·28 讨论………………………………·………………………………………………………30 结论………………………………………………………………………………………·35 参考文献……………………………………………………………………35 综述骨肉瘤综合治疗的研究进展……………………………………………38 致谢………………………………………………………………………………………………47 个人简历…………………………………………………………………………48 中文摘要 紫杉醇脂质体与依托泊苷对骨肉瘤细胞株作用 的细胞毒性及其分子机制研究 摘 要 目的：探讨紫杉醇脂质体(paclitaxel VP．16)对人骨肉瘤细胞株MG．63的细胞毒性及其分子机制的对比研究， 为紫杉醇脂质体、依托泊苷治疗骨肉瘤的合理性选择提供实验依据。 培养，待细胞进入对数生长期用于实验。 1药物的配制：将紫杉醇脂质体用lOml5％葡萄糖注射液稀释，震荡器 的储备液，4℃避光保存。使用前用DMEM培养基稀释成所需浓度。 2细胞形态学观察：将不同浓度的紫杉醇脂质体和依托泊苷分别作用 况并照相。 3 la MTT试验：调整细胞浓度为5×104／ml，每孔200l接种于96孔板， 进入对数生长期后采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测不同浓度紫杉醇脂 u g／m1)对细胞的生长抑制作用。 4流式细胞仪检测细胞凋亡：采用不同浓度的紫杉醇脂质体与不同浓 度的依托泊菅，药物作用48h，收集实验组及对照组细胞，调整细胞浓度为 IV型流式细胞仪检测细胞凋亡． Epic．XL 5 用人成骨肉瘤细胞MG．63 Bax的表达。 结果：1．细胞形态学倒置显微镜下观察，将紫杉醇脂质体按不同浓 慢慢变成圆形，细胞内质聚集，细胞与细胞间距增大，随着药物浓度的增 中文摘要 加，胞浆内颗粒也随之增多，细胞与平皿的附着力减弱，出现不同程度的 细胞漂浮。对照组细胞形态生长正常，细胞增殖状态良好。不同浓度的依 托泊苷作用于MG．63细胞48h后，观察可出现明显的受抑制作用，且随 着药物浓度的增加，抑制