细菌检查与防治的.ppt

课程名称：医 学 微 生 物 学 ;教学目的： 掌握临床细菌标本的采集、送检原则,革兰染色法的步骤 熟悉病原菌的检验程序、常用血清学试验的原理 了解细菌学检查在临床诊断中的重要性;教学方法：理　　论;细菌学诊断 (bacteriological diagnosis);临床细菌标本的采集、送检原则;3.早期取材 (1)疾病早期 (2)使用抗菌药物之前,如已用抗生素,应停 用1—2天 (3)机体免疫因素形成之前 (4)未出现合并或继发感染之前;4. 快速送检 : 大多数细菌低温送检,但奈瑟球菌须30--40℃保温送检;1 、直接涂片镜检;(1)不染色标本的检查 主要用于观察病原菌的某些形态特点 及运动性 ?常用的方法有压滴法和悬滴法 如:用压滴法观察霍乱弧菌的“鱼群样运动”;(2)染色标本的检查;单染色:只用一种染料进行染色.;复染色:用两种或两种以上的染料进行 染色;革兰染色法步骤:;;结果: 染成紫色称革兰染色阳性 G+ 染成红色称革兰染色阴性 G- ; G+ G-;意义 : (1)鉴别细菌 (2)指导临床用药 (3)了解细菌的致病性;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;二、分离培养→纯培养： ;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;三、生化反应： ;四 、血清学鉴定: (serological identification)： ;原理： 将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸收琼脂中水分溶解后不断向纸片周围扩散形成递减的梯度浓度，在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制，从而形成无菌生长的透明圈即为抑菌圈。 抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度，并与该药对测试菌的MIC呈负相关。 ;;原理： 聚乙烯板内含有各种稀释度的抗菌药物，实验时 加入100μl浓度为105 CFU/ml的菌液，盖上盖板，35℃ 16～20h观察结果。孔底部清晰不出现细菌沉淀的最低 抗菌药物浓度即为该抗菌药物对细菌的最小抑菌浓度， 通过CLSI标准判断其敏感和耐药。再取0.01ml容量接种 环取肉眼观察无菌生长的液体接种于血琼脂平板作次代 培养，经35℃过夜培养后观察最低抗菌药物浓度能杀死 99.9％原始种入的细菌即为该菌的最低杀菌浓度(MBC)。 ; 用微量加样器接种100μl 到96孔中，盖上盖板。 同时作阳性、阴性对照。 ;原理： E试条是一条5mm×50mm无孔试剂载体，一面 固定有一系列预先制备的浓度呈连续指数增长稀释抗 菌药物，另一面有读数和判别的刻度。抗菌药物的梯 度可覆盖有20个MIC对倍稀释浓度的宽度范围。将E 试条放在细菌接种过的琼脂平板上，经孵育过夜，围 绕试条明显可见椭圆形抑菌圈，圈的边缘与试条交点 的刻度浓度即为抗菌药物抑制细菌的最小抑菌浓度， 对照CLSI标准判断其敏感、耐药、中介。 ; 孵育后形成一椭圆形抑菌圈，抑菌圈和试条的相交 处的刻度即为抗菌药物对该菌的最低抑菌浓度(MIC) 。;六、细菌成分的检测 (detection of bacterial an