亮氨酸补充改善高脂大鼠胰岛素抵抗和胰岛素信号通路相关机制地研究.docxVIP

华中科技大学硕士学位论文的体重开始升高；第 7周时，HFD组大鼠体重已显著高于 ND组（P 0.05）；11周以后，HFD + 1.5%Leu组大鼠体重显著高于 HFD组大鼠（P 0.05）。亮氨酸补充对正常大鼠体重无明显影响。2．胰岛素敏感性（1）各组大鼠的空腹血糖水平无显著性差异；HFD组大鼠的血胰岛素水平显著高于 ND组（P 0.05），高脂饲料亮氨酸干预组的空腹血胰岛素水平均明显低于 HFD组，且差异有统计学意义，P 0.05。HFD组的 HOMA-IR指数显著高于 ND组（P 0.05）；亮氨酸补充可显著降低高脂饲料喂养大鼠 HOMA-IR指数，改善胰岛素抵抗 (P0.05)，但对正常大鼠胰岛素敏感性无显著影响。（2）胰岛素刺激实验结果表明，在胰岛素注射 15 min及 30 min后, HFD组大鼠的血糖值显著高于 ND组（P 0.05），并且 HFD组大鼠血糖曲线下面积（AUC）明显高于 ND组，出现胰岛素耐量异常(P﹤0.05)；HFD + 1.5%Leu组大鼠在胰岛素注射 15 min及 30 min时间段内，血糖值明显低于 HFD组(P﹤0.05)，且 HFD + 1.5%Leu组大鼠 AUC显著性低于 HFD组，P﹤0.05。3．骨骼肌、肝脏及脂肪组织胰岛素信号通路(1)骨骼肌、肝脏及脂肪组织 IRS-1及其磷酸化蛋白表达水平与基础状态相比，急性胰岛素刺激后 ND组大鼠脂肪 pSer302IRS-1蛋白表达水平显著升高(P﹤0.05)。无论是在基础状态还是在胰岛素刺激状态，高脂膳食均能使骨骼肌、肝脏及脂肪组织 pSer302IRS-1蛋白表达水平显著增高（P0.05）；亮氨酸对骨骼肌、肝脏及脂肪组织 pSer302 IRS-1的蛋白表达水平没有影响。补充亮氨酸能够显著增加基础状态下 ND组和 HFD组骨骼肌、肝脏及脂肪组织的 pTyr632 IRS-1蛋白表达水平（P0.05），对胰岛素刺激后的 pTyr632IRS-1蛋白表达水平无明显影响。(2)骨骼肌、肝脏及脂肪组织 Akt及 pSer473Akt蛋白表达水平在基础状态下，HFD组大鼠骨骼肌、肝脏及脂肪组织 pSer473 Akt蛋白表达水平较 ND组升高(P﹤0.05)。与基础状态相比，急性胰岛素刺激可显著升高 ND组大鼠骨骼肌、肝脏及脂肪组织 pSer473 Akt蛋白表达水平(P﹤0.05)，但不能进一步升高 HFD组大鼠骨骼肌、肝脏及脂肪组织 pSer473 Akt的蛋白表达。补充亮2华中科技大学硕士学位论文氨酸对基础状态下 ND组和 HFD组大鼠骨骼肌及脂肪组织 pSer473 Akt蛋白的表达均无明显影响，但可显著增强胰岛素刺激后的 HFD组大鼠骨骼肌及脂肪组织pSer473 Akt的蛋白水平(P﹤0.05)。无论是基础状态还是胰岛素刺激状态，补充亮氨酸均有增加大鼠肝脏 pSer473 Akt蛋白表达水平的趋势，尤其是能够显著增加胰岛素刺激后 HFD组大鼠肝脏 pSer473 Akt蛋白水平(P﹤0.05)。(3)骨骼肌、肝脏及脂肪组织 mTOR及 pSer2448 mTOR蛋白表达水平基础状态下，HFD组大鼠肝脏及脂肪组织 pSer2448 mTOR蛋白表达水平较ND组升高(P﹤0.05)。与基础状态相比，急性胰岛素刺激可显著升高 ND组大鼠骨骼肌及肝脏 pSer2448 mTOR蛋白表达水平(P﹤0.05)，但不能升高 HFD组大鼠骨骼肌、肝脏及脂肪组织 pSer2448 mTOR蛋白表达。补充亮氨酸没有改变基础状态下 ND组和 HFD组大鼠骨骼肌、肝脏及脂肪组织 pSer2448 mTOR蛋白的表达，但是可显著增强胰岛素刺激后 ND组和 HFD组大鼠肝脏 pSer2448 mTOR的蛋白水平(P﹤0.05)，以及显著增强胰岛素刺激后 HFD组大鼠骨骼肌和脂肪组织pSer2448 mTOR的蛋白水平(P﹤0.05)。结论：1．高脂膳食可以诱导大鼠发生胰岛素抵抗；膳食补充亮氨酸可显著增加高脂喂养胰岛素抵抗大鼠的胰岛素敏感性，改善胰岛素抵抗，但对正常大鼠胰岛素敏感性无明显影响。2．亮氨酸可能是通过改善骨骼肌、肝脏及脂肪的胰岛素信号，增加胰岛素敏感性，进而改善胰岛素抵抗。关键词：胰岛素敏感性；亮氨酸；胰岛素抵抗；IRS-1；AKT；mTOR创新点：本实验是建立在高脂膳食诱导的胰岛素抵抗大鼠模型的基础上，通过膳食补充亮氨酸，分别阐明亮氨酸对正常大鼠和胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性的影响。从胰岛素信号通路的分子水平，深入研究亮氨酸对胰岛素抵抗的作用机制。为亮氨酸防治代谢性疾病提供新的科学依据，成为膳食防治胰岛素抵抗的新热点。3华中科技大学硕士学位论文The effects and the underlying mechanisms of