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Chfr基因在急性白血病骨髓细胞中表达探究 　 作者：龚辉，刘文励，周剑峰，冉丹，徐慧珍 【摘要】 为了探讨急性白血病（AL）患者骨髓细胞中有丝分裂早期检查点Chfr基因的表达及其意义，对46例初诊未治疗的AL患者骨髓单个核细胞，用RT-PCR和免疫组织化学的方法检测Chfr基因mRNA及蛋白的表达，并与正常人骨髓单个核细胞进行对照。结果表明：免疫组织化学和RT-PCR分析显示，28例急性髓细胞白血病（AML）中的15例，18例急性淋巴细胞白血病（ALL）中的13例骨髓单个核细胞Chfr基因mRNA和蛋白的表达与正常对照相比显著下降，同时Chfr基因表达异常病例染色体检查存在核型异常。结论： 急性白血病骨髓细胞有丝分裂检查点Chfr基因表达受损，可能在白血病发病中具有重要作用。 【关键词】 急性白血病 　　Analysis of Expression of Mitosis Checkpoint Gene Chfr in Bone Marrow Cells of Acute Leukemia Patients 　　Abstract This study was purposed to investigate the significance of mitosis checkpoint gene chfr expression in acute leukemia (AL). 2 ml of bone marrow were extracted　from each of 46 AL patients and 10 normal donors as control and their mononuclear cells were isolated. Then，their chfr expression was detected by using RT-PCR and immunohistochemistry. Normal control blood samples were also analyzed. The results showed that in 15 out of 28 cases of acute non-lymphocytic leukemia and 13 out of 18 cases of acute lymphocytic leukemia expression of chfr gene mRNA and protein significantly decreased as compared with control. The cytogenetic analysis of patients with a decreased Chfr expression revealed abnormal chromosome. In conclusion，Chfr gene is a leukemia-related gene and may play an important role in leukemia pathogenesis. 　　Key words acute leukemia；mitosis checkpoint；Chfr gene；bone marrow cell 　　细胞在长期进化过程中发展出了一套保证细胞周期中DNA复制和染色体分配质量的检查机制，通常被称为细胞周期检查点（checkpoint）。后者也称M期检查点。既往对G2/M期检查点的研究较多，而对M期检查点研究较少，特别是以前发现的所有有丝分裂检查点基因（mitosis checkpoint gene）都不能很好地解释其与癌症发生之间的关系，Chfr是Scolnick等［1］于2000年发现的一个M前期检查点基因，定位于12q24.33。细胞存在有丝分裂应激时，Chfr通路激活延迟染色体凝集。目前认为chfr基因可能控制着最初的癌变过程，有作者［2-4］ 相继证实，Chfr基因与肿瘤相关，但与人急性白血病(AL)发病之间的关系目前不清楚。我们分析了46例急性白血病患者骨髓单个核细胞中Chfr基因的表达及可能的作用。 　　材料和方法 　　细胞系与病例 　　白血病细胞系HL-60由同济医院肿瘤生物医学中心马丁教授惠赠。培养于含10％小牛血清的RPMI 1640培养液，置37℃，5％ CO2培养箱中培养。46例AL患者骨髓细胞标本来自本院血液内科住院初诊未治疗患者，诊断按张之南主编《血液病诊断及疗效判断标准》。其中AML 28例，ALL 18例，男24例，女22例，中位年龄32岁。按标准方案化疗判断疗效，分A、B两组，A组为部分缓解及未缓解，B组 　　为完全缓解。10例正常人骨髓来源于异基因骨髓移植的正常供者。 　　RNA提取及RT-PCR