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Skp2及恶性肿瘤关系探究进展 　【关键词】 Skp2 恶性肿瘤 肿瘤的发生是正常细胞染色体多重损伤的复杂过程，包括抑癌基因的失活，原癌基因的异常激活，DNA转录失控，DNA损伤等。不论何种原因造成的细胞转化，其最终表现均为细胞周期调控机制紊乱，导致细胞失控性生长。 泛素-蛋白酶体途径是真核细胞生物内重要的蛋白质调控系统，通过对泛素化蛋白降解，在细胞周期进展，基因转录，信号转导及免疫反应等过程中发挥重要作用。Skp2是细胞从G1期进入S期的必需因子，是泛素连接酶复合物(Skp1 Cullin F box,SCF)中DNA复制所必须的一种F-box蛋白，在泛素化过程中负责对底物蛋白的识别和泛素化降解。Skp2通过对多种靶蛋白的泛素化降解，干扰细胞周期正常运行，参与了细胞增殖和凋亡的调控。 国内外研究发现Skp2在肿瘤转化细胞中有异常表达，引起细胞周期调控的异常，促进细胞恶性转化，参与肿瘤的发生和发展。 1 Skp2的名称由来 Zhang等［1］首次分离了编码P19和P45的cDNA，体外重组实验发现P19和CycinA-CDK2的结合需要P45；体内微量注射抗体或反义寡核苷酸干扰P45的功能，细胞不能进入S期；且它与任何一个功能明确的蛋白都没有明显的同源性。因P45是以前从未报道的CyclinA - CDK2 相关蛋白且又主要存在于恶变细胞的S期，故被命名为S期激酶相关蛋白2，简称Skp2。 2 Skp2的结构 Skp2基因是1995年由Demetrick等通过荧光原位杂交发现的一个与细胞周期调控密切相关的基因，其定位于5P1,3，该位点与染色体组型的改变有关［2］。编码的蛋白质由436个氨基酸组成，分子量约45kD。目前所知的Skp2含有1个F-盒区、10个富亮氨酸重复区(leucine-rich repeat,LRR)及1个C-末端尾巴结构，三者依次相互连接。约由40个氨基酸组成的F-盒区由三个α-螺旋结构构成，与Skp1调节蛋白相连。每个LRR由一个β-链和一个α-螺旋构成，LRR在蛋白泛素化过程中与底物蛋白直接相连。目前，N-端约100个氨基酸区域结构和功能尚不完全清楚［3］。 3 Skp2的功能 Skp2 作为人类F-box蛋白家族中的一员，在许多细胞周期调控因子的泛素依赖性蛋白水解途径中起到特异性识别底物的作用，从而参与细胞周期的调控。 　　3.1 Skp2与泛素蛋白酶体途径 泛素蛋白酶体途径(ubiquitin proteasome pathway)是真核细胞中的一种蛋白降解途径，主要降解细胞内泛素化的蛋白质。泛素经过泛素活化酶E1、泛素结合酶E2及泛素连接酶E3等一系列催化步骤结合底物蛋白，形成泛素一底物蛋白复合体，使底物进人26S蛋白酶体内实现泛素化降解。SCF的F-box亚基能特异性识别底物并与之结合，使之进入泛素化降解。Skp2正是F-box蛋白家庭成员之一［4］。 　　3.2 Skp2与细胞周期调控 细胞周期的运行受多种因素所调控。有两个主要调控点：一个处于G1/S转折点，是控制细胞进入S期的控制点(G1期关卡)，另一个处于G2/M转折点，是控制细胞进入M期的控制点(G2期关卡)。如G1期关卡失控，就会使应该停止增殖或生理性凋亡的细胞不停地进入细胞周期，导致细胞恶性增生及癌的形成。参与细胞周期调控的主要因子有：周期蛋白(cyclin),周期蛋白依赖性激酶(cyclin dependent kinase，CDK)，周期蛋白依赖性激酶抑制剂(CKI)。CDK与cyclin-CDK复合物正性催化细胞周期过程,而CKI通过与cyclin、CDK或cyclin-CDK复合物结合抑制并阻断细胞周期进程。肿瘤发生的共同特征是细胞周期调控机制的紊乱导致细胞的失控性生长。 目前已发现许多细胞周期调控因子，如E2F, cyclin Dl、cyclin E， cyclin A， cyclin B，CDC25B， p21wafl，p27kipl， p53都是泛素蛋白酶体途径的底物［5］。其中p27kipl与Skp2的关系最受关注。p27 就是一种负性调节细胞增殖的CKI，被认为是一种候选的抑癌基因。研究发现p27kipl异常表达与许多恶性肿瘤的预后密切相关［6］。 　　3.3 Skp2与p27的关系 p27kipl是G1期检查点相关基因，负性调节细胞增殖，被认为是一种抑癌基因。细胞周期G1期向S期过渡需要p27kipl的降解，其浓度在静息的G1期细胞中很高，进入S期时达到最低。Wagner M等［7］在衰老的纤维母细胞中研究发现，Skp2 减少，p27kipl 相对增多，则细胞被阻止在G1期，不能进入S合成期