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乳腺癌雌、孕激素受体及PCNA表达 　【摘要】 目的 探讨增殖细胞核抗原(PCNA)的表达与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)之间的相互关系及联合检测对乳腺癌术后内分泌治疗方案制定和预测、预后的意义。方法 采用免疫组织化学链霉素生物蛋白过氧化物酶(S-P)法检测80例乳腺癌组织中PCNA、ER和PR的表达。结果 (1)80例乳腺癌组织中，ER、PR、PCNA的阳性表达率分别为65.0％,575％和6375％。(2)乳腺癌有淋巴结转移组PCNA阳性表达率显著高于无淋巴结转移组(Plt;0.01)，且呈正相关(Plt;0.01)，即淋巴结转移程度越低,PCNA阳性表达率亦越低。(3)PCNA阳性表达率在乳腺癌ER与PR阴性组均明显高于乳腺癌ER与PR阳性组(Plt;0.01)，且均呈负相关(Plt;001)，即ER与PR阴性则PCNA阳性表达率高。结论 PCNA阳性表达率与ER、PR阳性或阴性结果有关，PCNA与ER、PR联合检测，可为乳腺癌术后内分泌治疗方案的制定和预测预后提供辅助依据。 【关键词】 乳腺癌 　　乳腺癌为妇女恶性肿瘤死因首位，其预后的判断及与预后相关的生物标志物的测定倍受关注。乳腺癌雌激素受体(Estrogen Receptor，ER)、孕激素受体(Progesterone Receptor，PR)水平是公认的估测乳腺癌患者预后和选择治疗方案的指标,而增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen，PCNA)是一种表达细胞增殖周期的36kd多肽，直接参与细胞增殖过程中DNA的复制，其表达程度能客观反映肿瘤细胞的增殖活性，过度表达增加了瘤细胞转移趋势的危险性，因此，认为PCNA也可作为判断乳腺癌预后的指标〔1〕。为分析乳腺癌激素受体状态及其与肿瘤细胞增殖活性之间的关系，肿瘤细胞增殖活性的强弱与乳腺癌生物学行为的关系，对80例乳腺癌同时检测PCNA、ER和PR的表达，探讨其相互关系及在评估预后上的意义。 　　1 对象与方法 　　11 对象 收集我院1992～2002年女性乳腺癌根治标本病理检查存档资料80例，年龄32～72岁，平均年龄4846岁。全部资料经2位病理医师审核，患者术前未做过放、化疗。所有标本均经10％福尔马林固定，石蜡包埋，4μm连续切片。乳腺癌分类根据“中国常见恶性肿瘤诊治规范”分为非浸润性癌、早期浸润性癌、浸润性特殊癌、浸润性非特殊癌4类。 　　12 试剂 鼠抗人ER、PR，Ⅰ抗PCNApc10和链霉素生物蛋白过氧化物酶(S-P)试剂盒及过氧化物酶底物作用液二氨基联苯氨(Diaminobenzidine，DAB)(北京中山生物技术有限公司)；用己知乳腺癌组织阳性切片(中山公司赠)为阳性对照，用磷酸盐缓冲液(PBS)代替I抗做阴性对照。 　　13 方法 采用（S-P）法染色，按试剂盒说明书操作：二甲苯脱蜡，梯度酒精至水化后高压锅热处理5～8min，过氧化物酶阻断血清封闭，加I抗60min，磷酸盐缓冲液洗3次，每次2min；Ⅱ抗15min，磷酸盐缓冲液洗3次，每次2min;Ⅲ抗同Ⅱ抗。DAB显色5～10min，苏木素复染5～10s，脱水，透明胶封片。 　　14 结果判断 ER、PR阳性表达以细胞核内有棕色颗粒为阳性细胞，并根据着色程度和比例划分反应等级，≤30％为阴性，30％～40％为轻度阳性，40％～60％为中度阳性，gt;60％为重度阳性反应；PCNA以细胞核内出现清晰的棕色或棕黄色颗粒为阳性诊断标准，每例切片至少观察5个高倍视野。 　　15 统计分析 采用SPSS100 软件对各组ER、PR及PCNA阳性表达率进行χ2检验、Fisher确切概率检验和Kendall等级相关分析。 　　2 结果 　　21 乳腺癌ER、PR、PCNA的阳性表达率 80例乳腺癌中，ER、PR、PCNA的阳性表达率分别为650％(52／80)，575％(46／80)和6375％(51／80)。 　　　22 PCNA与乳腺癌淋巴结转移及组织类型的关系 在80乳腺癌标本中，有淋巴结转移52例，PCNA阳性表达率为750％(39／52)，无淋巴结转移28例，PCNA阳性表达率为420％(12／28)；有淋巴结转移组PCNA阳性表达率显著高于无淋巴结转移组(χ2=8137,Plt;001)，且呈正相关(rs=0293,Plt;001)，即淋巴结转移程度越低、PCNA阳性表达率亦越低。非浸润性癌、早期浸润性癌、浸润性特殊癌、浸润性非特殊癌组织类型与其PCNA阳性表达率［375％(3/8)，400％(4／10)，600％(6／10)，7308％(38／52)］呈正相关(rs=0286,Plt;005)，即肿瘤恶性程度越高，PCNA阳性