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复方甘草酸苷中有关物质测定 　 作者：田莉 高晓黎 田春海 云奇 【摘要】 目的建立同时测定复方甘草酸苷片中3个主成分有关物质的反相高效液相色谱法（二极管阵列检测器），以控制其质量。方法采用C18色谱柱，以0.025 mol·L-1醋酸钠溶液（pH 3.5）-乙腈（59∶41)洗脱，检测波长251,360 nm。 结果样品中各主成分与有关物质的分离度及检出灵敏度可满足测定要求，甘草酸单铵盐，甘氨酸，DL-蛋氨酸最低检出限分别为2.02,0.28,0.96 ng。结论该法灵敏、准确、简便、专属性强，可作为该制剂质量控制的有效手段。 【关键词】 复方甘草酸苷片 甘草酸单铵盐 甘氨酸 DL-蛋氨酸 有关物质 反相高效液相色谱法 Abstract：ObjectiveTo develop a reversed-HPLC method （PDA） for simultaneous determination of related substances of three major components in compound glycyrrhizin tablet.MethodsA C18 column was used with the mobile phase of 0.025 mol·m l-1 NaAC solution（pH 3.5）- acetonitrile (59∶41) and the detection wavelength was at 251 nm and 360 nm. ResultsResolution and detectable sensitivity of each constituent in samples satisfied the detection demand of related substance. The LOD of glycyrrhizin , glycine, DL-methionine were 2.02 ng，0.28 ng and 0.96 ng, respectively. ConclusionThe method is sensitive，accurate，simple and specific. It can be used as a reliable method for the quality control of compound glycyrrhizin tablet. Key words：Compound glycyrrhizin tablets; Glycyrrhizin; Glycine; DL-methionine; Related substance; RP-HPLC 复方甘草酸苷片（商品名：美能）是由甘草酸单铵盐，甘氨酸，DL-蛋氨酸组成的复方制剂，于1948年在日本上市，现主要用于治疗慢性肝病，改善肝功能异常，亦可用于治疗过敏性反应（如皮疹、荨麻疹、药物疹）、斑秃、系统性红斑狼疮及传染性非典型肺炎等，疗效确切，已于临床应用多年［1，2］。从传统中药材甘草中可提取得到甘草酸，再经成盐可制备得甘草酸单铵盐，长期以来被广泛应用于医药，食品和化妆品等领域，对其临床以及其它用途的安全性检验已获得FDA的认可［3］，但国家标准中规定甘草酸单铵盐的含量为73.0%［4］，说明甘草酸单铵盐原料药的有关物质含量高。为保证本制剂批间质量的一致性和安全性，进行有关物质考察实验。 1 仪器与试药 日本岛津SCL-20AVP型高效液相色谱仪，SPD-M20二极管阵列检测器（PDA）， LC-solution岛津色谱工作站；THZ-82型恒温水浴振荡器(上海常思工贸有限公司)；BP211D精密天平（德国Sartorius）。 乙腈为色谱纯，2,4-二硝基氟苯（DNFB），冰醋酸，无水醋酸钠，碳酸氢钠，氢氧化钠均为分析纯。水为双蒸水。 甘草酸单铵(中国药品生物制品检定所，批号11073-200513)；甘氨酸(中国药品生物制品检定所，批号140689.200401)，DL-蛋氨酸(Sigma公司，批号0580123，含量＞99 %)。复方甘草酸苷片(新疆特丰药业股份有限公司，批20070514。复方甘草酸苷片(商品名：美能；日本米诺发源制药株式会社生产，批号06130)。 2 方法与结果 2.1 色谱条件［5］Shimadzu VD-ODS C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)，流动相为0.025 mol·L-1醋酸钠溶液（pH 3.5）-乙腈（59∶41）；流速1 ml·min-1；柱温35℃；检测波长λ甘草酸=251 nm，λ氨基酸=360 nm；进样量20 μl。以空白辅料溶液、对照品溶液和供试品